实时荧光定量PCR技术详解和总结概述.pptx
快乐****蜜蜂
亲,该文档总共22页,到这已经超出免费预览范围,如果喜欢就直接下载吧~
相关资料
实时荧光定量PCR技术详解和总结概述.pptx
实时荧光(yíngguāng)定量PCR技术详解和总结概述目录(mùlù)实时(shíshí)定量PCR基本原理定量PCR技术:利用荧光信号的变化实时(shíshí)检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,最终精确的对起始模板的定量分析定量(dìngliàng)PCR三个基本概念阈值(yùzhí)与C(t)值定量(dìngliàng)PCR的数学原理荧光强度---循环数曲线定量(dìngliàng)原理定量(dìngliàng)PCR的实验步骤实验(shíyàn)材料////////
实时荧光定量PCR概述.ppt
实时荧光定量PCR技术研究概述诞生原理2、探针类(TaqMan探针法)方法按荧光产生的原理有两种方法:荧光探针法和荧光染料法。染料法利用SYBRGreen分子产生的荧光信号来进行样品定量。与常规PCR类似,唯一区别是在反应体系中加入了SYBRGreen染料分子。探针法:与常规PCR的不同之处在于:在上下游引物外还加入了让具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比,提高了实验的特异性。目前市场上探针多样,其中以TaqMan探针应用最为广
实时荧光定量PCR技术详解和总结PPT课件.ppt
实时定量PCR技术目录实时定量PCR基本原理定量PCR技术:利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,最终精确的对起始模板的定量分析定量PCR三个基本概念阈值与C(t)值定量PCR的数学原理荧光强度---循环数曲线定量原理定量PCR的实验步骤实验材料
实时荧光定量PCR技术原理.ppt
实时荧光定量PCR技术原理、应用及实践主要内容PCR:基本原理PCR:基本原理Real-timeqPCR扩增曲线(primarycurve)Ct值(CycleThreshold)Ct值(CycleThreshold)Ct值可以确定初始模板量?y=-ax+b测定荧光定量PCR反应的有效性--线性的标准曲线:相关系数R2--扩增效率:扩增效率(E)=10-1/斜率-1荧光定量PCR检测方法SYBRGreenI融解曲线分析Taqman工作原理Taqman工作原理SYBRGreenI与Taqman对比荧光定量PC
实时荧光定量PCR.doc
实时荧光定量PCR实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBiosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。本文试就其定量原理、方法及参照问题作一介绍。一、实时荧光定量PCR原理所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。1.Ct值的定义在荧光定量PCR技术中