小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用的研究及机制的任务书.docx

小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用的研究及机制的任务书
任务书
题目：小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用的研究及机制
研究背景：
七氟烷是一种有机氟化物麻醉药，可在一定程度上减轻脊髓缺血再灌注损伤引起的炎症反应，进而降低脊髓细胞的死亡率。而小胶质细胞在中枢神经系统中起到了重要的免疫调节作用，尤其在脊髓缺血再灌注损伤中的作用备受关注。然而，对于小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用及机制的研究还比较少见，因此有必要进行相关研究。
研究目的：
本研究旨在探讨小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的作用及其机制，为脊髓缺血再灌注损伤的治疗提供新的思路和方法。
研究内容：
1.建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型
2.观察七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤后小胶质细胞数量的变化
3.观察七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤后小胶质细胞炎症因子的表达量变化
4.观察七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤后小胶质细胞凋亡情况的变化
5.探讨小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的具体作用机制
研究方案：
1.实验对象：健康雄性SD大鼠，体重250-300g。
2.实验分组：
对照组（sham组）：仅进行颈部切口和血管暴露，无缺血再灌注损伤。
脊髓缺血再灌注损伤组（IRI组）：大鼠通过颈动脉结扎引起脊髓缺血再灌注损伤。
七氟烷预处理组：在IRI操作前30分钟进行七氟烷预处理。
3.实验操作：
3.1建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型：通过颈动脉结扎引起脊髓缺血再灌注损伤模型。手术时，先行进行全麻，其后取暴露颈部，较小心肺复苏管放入气管，连接好预备好的麻醉机。用145号外科剪刀摆脱颈部皮肤，屏障后、前床把大麻醉静脉注入氯胺酮16mg/kg，咪达唑仑4mg/kg后，放入鼻喉导管，调为1.5~2%恒压麻醉，缝紧。在该动脉与交通动脉及前下证动脉之间密切部位，末叶静脉外剥暴露颈总动脉，并绕处一圈线号埋线结扎。1小时后缓解手术动物全麻，则取出尿道瘤。将暴露根部的1-4节脊髓4-6mm切断。3
3.2观察七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤后小胶质细胞数量的变化：将动物处死后，取出脊髓组织，通过荧光显微镜观察和计数小胶质细胞的数量。
3.3观察七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤后小胶质细胞炎症因子的表达量变化：采用ELISA法检测小胶质细胞培养液中相关炎症因子的表达水平。
3.4观察七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤后小胶质细胞凋亡情况的变化：用TUNEL方法观察大鼠脊髓中小胶质细胞的细胞凋亡情况。
3.5探讨小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的具体作用机制：通过Westernblot和Real-timePCR等方法研究小胶质细胞在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的信号传导机制。
研究意义：
七氟烷与小胶质细胞在脊髓缺血再灌注损伤中的作用机制及相互作用机制尚未明确，本研究将拓展我们对七氟烷预处理大鼠脊髓缺血再灌注损伤机制的认识，为临床上脊髓缺血再灌注损伤的治疗提供新思路，为提高大鼠姿势的捕获效率提供依据。
参考文献：
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3.PatelNM,PachatM,KorimWS,etal.Microgliaandinflammatoryresponsesintheyolksacandbrainoftilapiaduringrussell'svipervenomexposure[J].Fish&ShellfishImmunology,2014,36(1):109-18.