血栓与止血检验基本方法概述.pptx

第十三章
血栓与止血检验基本方法教学要求
1.掌握PT时间、APTT、3P试验、FDPs、血浆D-二聚
体等试验的检测的原理及临床意义、正常吸附血
浆、正常血清所含的凝血因子、过敏性紫癜、ITP
、DIC、Even综合征的概念及临床表现，过敏性紫
癜的主要过敏原、ITP的诊断标准，血友病诊断和
分型。
2.熟悉各型血友病及血管性血友病因子检测的意义、
血栓与止血筛选试验的应用，过敏性紫癜、ITP、
血友病、DIC、Even综合征的实验室检查。
3.了解血小板检测、抗凝血酶检测、血浆纤溶活性
检测和血栓前状态检测的意义、其他凝血障碍性
疾病的检验。(一)血浆凝血酶原时间测定（PT）
1.原理
在受检血浆中加入足量组织凝血活酶（即TF）浸出液和和适量Ca2+离子后，血浆凝固所需的时间称为血浆PT。
2.参考值
(1)平均为12s±1s,男性：11s～13.7s；
女性：11s～14.3s，超过对照3s以下为异
常。
(2)PT时间比值（PTR）=被检血浆PT（s）/正
常参比血浆PT（s），宜用多份正常血浆PT
的几何均数参考值为1.00±0.15
(3)国际标准化比值(INR)=PTR[S]
参考值因国际敏感度指数[S]而异。INR：需先求得所用组织凝血活酶的国际敏感度指数[S]，是所用组织凝血活酶与已知参比品相比较的一个参数。是用多份凝血因子水平不同的血浆（包括正常人和口服抗凝剂患者的血浆），用参比品测得它们的logPT，再用待标定的组织凝血活酶测得它们的logPT，以前者为纵坐标，后者为横坐标作图，经回归求得直线斜率。即待标定的组织凝血活酶的[S]=已知[S]×斜率。[S]值越低，试剂对有关凝血因子降低的敏感度越高。再按下式求得INR：INR=PTR[S]3.临床意义：是外源性凝血途径的筛选试验。
(1)PT延长
①Vitk缺乏：Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ统称为依赖Vitk凝
血因子。Vitk↓、因子↓→PT↑。
②抗凝治疗，香豆素类抗凝药物与Vitk化学结
构相似，竞争性拮抗，使PT↑。
③肝病：肝脏是合成除组织因子（Ⅲ）、钙（Ⅳ）
及Ⅷ因子外其他因子的主要场所，肝受损→凝
血因子合成↓→PT↑。
④先天性凝血因子缺乏症：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ。
⑤抗凝物质增多。
(2)PT缩短：常见于血栓前状态和血栓性疾病。
(二)活化部分凝血活酶时间测定
1.原理：37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ和
Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板3
因子，在Ca2+参与下，观察贫血小板血浆凝固
所需的时间，即为活化部分凝血活酶时间
（APTT）。2.参考值
男：37s±3.3s
女：37.5s±2.8s
超过正常对照10s以上为异常。
3.临床意义：是内源性凝血系统敏感而简便的筛
选试验。
(1)APTT时间延长：
①内源性凝血途径因子缺乏：Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ。
②外源性凝血途径因子缺乏：Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ。
③血中抗凝物质增多。
(2)APTT时间缩短：可见于高凝状态及血栓形成
性疾病。三、纤溶活性的筛查试验
血浆纤溶活性增强的筛查，一般选用能直接或间接检测出血浆纤溶酶降解纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）的试验，临床常用的有：凝血酶时间（thrombintime，TT）、血浆鱼精蛋白副凝固试验（plasmaprotaminepracoagulationtest，3Ptest）。(一)凝血酶时间测定
1.原理：受检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后、血浆凝固所需要的时间，即为凝血酶时间。
2.参考值：16s～18s。超过对照3s以上为异常。3.临床意义
(1)TT延长：
①肝素及肝素类抗凝物增多。
②FgDP(FbDP)↑→DIC(消耗Fb或Fg)。
③先天性纤维蛋白(原)异常或缺乏症。
(2)TT缩短:极罕见,主要见于某些异常蛋
白血症如巨球蛋白血症。(二)可溶性纤维蛋白单体试验：3P试验
1．原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasmaprotamineparacoagulationtest,3Ptest），是在待测血浆中加入硫酸鱼精蛋白,可使可溶性纤维蛋白单体(FM)与FDP(主要是X片段)形成可溶性复合物解离,游离的FM之间自行聚合呈肉眼可见的纤维絮状或胶冻状沉淀。2.参考值：阴性
3.临床意义
(1)原发性纤溶时：阴性。
(2)继发性纤溶时早期：阳性。
(3)DIC的晚期因FgDP或FbDP（X、Y）被降解为低分子量小碎片（D、E）：阴性。
(三)血浆D-二聚体检测
——乳胶颗粒浊度分析法
1.原理：受检血浆中加入标有D-二聚体单抗的胶乳
颗粒悬液，如果血浆中D-二聚体含高于0.5mg/L
时即可与胶乳颗粒上的抗体结合，发生胶乳颗
粒凝集。
2．血浆D-二聚体
是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发纤溶特有的代谢物。
3．意义
参考值阴性，在继发纤溶时（D