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猪轮状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用的任务书 任务书 任务名称:猪轮状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用 任务目的: 本任务旨在建立一种可靠的猪轮状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法,并在猪轮状病毒检测、流行病学研究以及疫苗研发等方面进行初步应用。 任务内容: 1.收集猪轮状病毒相关文献:收集猪轮状病毒相关文献,了解猪轮状病毒的基本特征、病原学和流行病学情况,为下一步的实验工作提供依据。 2.实验设计:设计鉴定猪轮状病毒的引物和探针,采用TaqMan荧光定量RT-PCR技术建立猪轮状病毒的定量检测方法,并进行反应体系、反应条件等的优化。 3.病毒分离与提取:从临床样本中分离猪轮状病毒,并采用RNA提取试剂盒对病毒RNA进行提取。 4.建立定量检测方法:根据实验设计,采用建立好的鉴定方法在已知猪轮状病毒阳性样本中进行TaqMan荧光定量PCR检测,建立定量检测方法。 5.初步应用:在采集的猪肠道样本中检测猪轮状病毒,并分析其流行病学情况。 6.结果分析:对所得结果进行分析并汇总,探讨该方法的灵敏度、特异性、准确度及应用前景等。 任务时间: 本任务的总时间为2个月,其中: 第1周:收集相关文献,制定实验计划; 第2周-第3周:设计引物、探针,优化反应体系和反应条件; 第4周-第6周:进行病毒分离和RNA提取; 第7周-第8周:建立定量检测方法,进行初步应用并分析结果; 第9周-第10周:对结果进行分析、总结、撰写报告。 任务预算: 本任务所需预算(单位:人民币)为: 实验用品及耗材:3000元 设备使用费:2000元 实验人员工资:10000元 文献资料费用:500元 总计:15500元 任务验收标准: 1.建立的猪轮状病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法具有可靠的灵敏度、特异性、准确度和稳定性,并已进行初步应用; 2.实验操作规范,实验记录完整,数据准确; 3.任务报告撰写规范,内容完整,结论准确,语言流畅。 任务执行人员: 任务执行人员需具有医学或生物学相关专业的本科及以上学历,有相关实验经验,能够独立或协同完成实验工作,撰写任务报告。