人Nanog基因shRNA慢病毒载体构建及其转染人胃癌裸鼠移植瘤的实验研究的中期报告.docx

人Nanog基因shRNA慢病毒载体构建及其转染人胃癌裸鼠移植瘤的实验研究的中期报告
本研究旨在构建人Nanog基因shRNA慢病毒载体并转染人胃癌裸鼠移植瘤，研究其对胃癌细胞增殖和转移能力的影响。
1.实验方法
1.1构建人Nanog基因shRNA慢病毒载体
采用PCR扩增人Nanog基因片段，并将其插入pLKO.1TRC慢病毒载体中，构建shRNA慢病毒载体pLKO.1-SN。shRNA合成后转化入DH5α菌液，进行筛选、测序，最终得到正确的克隆。
1.2转染胃癌细胞
将构建好的慢病毒载体通过三聚体共聚物转染入胃癌细胞株，筛选出稳定的转染细胞系。
1.3裸鼠移植瘤模型建立及实验
将转染过的胃癌细胞株移植入裸鼠体内，分别建立实验组和对照组。观察瘤体生长情况、肿瘤体积、组织学及分子生物学指标的变化。
2.实验结果
2.1成功构建人Nanog基因shRNA慢病毒载体
通过PCR扩增和测序验证，成功构建了含有人Nanog基因shRNA的慢病毒载体。
2.2成功转染胃癌细胞株
通过三聚体共聚物转染，成功将人Nanog基因shRNA载体导入胃癌细胞株，获得稳定的转染细胞系。
2.3裸鼠移植瘤模型建立
成功建立裸鼠移植瘤模型，观察到裸鼠体内的瘤体呈现出较快的生长趋势，并且对比实验组和对照组的肿瘤体积和重量，发现实验组的胃癌瘤体较对照组显著减小。
3.讨论与结论
本研究成功构建了人Nanog基因shRNA慢病毒载体，转染入胃癌细胞株，并通过裸鼠移植瘤模型进行实验验证。结果表明，该慢病毒载体可以成功抑制人Nanog基因的表达，抑制胃癌细胞的增殖和转移，具有潜在的抗癌治疗价值。然而，本研究仍需要进行更多的深入探究，以期更好地了解人Nanog基因的生物学功能及其与胃癌发生发展的关系。