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会计学实验材料基本原理实验内容经碱性染料结晶紫染色 经碘液媒染 用酒精脱色 有的细菌紫色不被脱去——(G+), 有的可被脱去——(G-)脱色后再用一种红色染料,如碱性番红等进行复染。 阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。 有芽孢的杆菌和绝大多数球菌,以及所有的放线菌和真菌都成革兰氏正反应(G+) 弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都成负反应(G-) 革兰式阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样。 革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度低,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。与细菌细胞壁的化学组成及结构有关 革兰氏阳性细菌由于细胞壁肽聚糖含量高,脂类含量低,乙醇处理使细胞壁脱水,肽聚糖层孔径变小,通透性降低,结晶紫碘复合物被保留在细胞内,细胞不被脱色。革兰氏阴性菌细胞壁脂类物质含量高,肽聚糖含量较低,乙醇溶解了脂类物质,使细胞壁通透性增加,结晶紫——碘复合物易被抽出,于是被脱色。阳性菌菌体等电点较阴性菌低,在相同pH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料较多,因此不易脱去,阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。方法与步骤制片干燥初染固定脱色复染镜检/严格掌握乙醇脱色程度,如脱色过度,则阳性菌被误染为阴性菌;而脱色不够时,阴性菌被误染为阳性菌。 菌龄也影响染色结果,如阳性菌培养时间很长,或已死亡及部分自行溶解了,都常呈阴性反应 大肠杆菌(G-)枯草芽孢杆菌(G+)金黄色葡萄球菌与大肠杆菌实验思考题项目