细菌的简单染色与革兰氏染色.ppt

细菌的简单染色与革兰氏染色一、目的要求二、基本原理简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态，简单染色不能辨别细菌细胞的构造。革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。三、实验器材四、实验方法及步骤（2）晾干让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。（3）固定手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。（4）染色将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上，加复红染色1-2min。（5）水洗用水洗去涂片上的染色液。（6）干燥将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。（7）镜检先低倍观察，再高倍观察，并找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂片上加香柏油一滴，将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。涂片2、革兰氏染色（6）媒染滴加卢哥氏碘液，媒染1min；（7）水洗用水洗去碘液；（8）脱色将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20-25s至流出液无色，立即水洗；（9）复染滴加蕃红复染5min；（10）水洗用水洗去涂片上的蕃红染色液；（11）晾干将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干；（12）镜检镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。五注意事项六实验报告球菌杆菌杆菌螺菌革兰氏阴性菌