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大蒜素诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及凋亡途径的实验研究的中期报告 本研究的目的是探究大蒜素(allicin)对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用及凋亡途径。本报告为中期报告,介绍了实验设计、方法和初步结果。 实验设计: 1.肝癌细胞HepG2株的培养:将HepG2细胞接种在含10%FBS的DMEM培养基中,培养至细胞密度达到80%。 2.不同浓度大蒜素的处理:将HepG2细胞分为以下5组:对照组、大蒜素低浓度组(10μM)、中浓度组(50μM)、高浓度组(100μM)和超高浓度组(200μM)。对照组不添加大蒜素,其他组分别添加相应浓度大蒜素,培养24小时。 3.细胞凋亡检测:采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测。 4.凋亡途径分析:Westernblot法检测凋亡相关蛋白及活性的表达,PCR方法检测凋亡相关基因的表达。 实验结果: 初步数据显示,大蒜素可明显诱导HepG2细胞凋亡,而且其效应具有剂量依赖性。大蒜素低浓度组和中浓度组的细胞凋亡率较对照组显著增加(P<0.05),而高浓度组和超高浓度组的细胞凋亡率则无显著差异。Westernblot结果显示,处理大蒜素组的Bcl-2蛋白表达明显下降,而Bax和caspase-3等凋亡相关蛋白表达则显著上升(P<0.01)。 结论: 本研究结果初步显示,大蒜素可明显诱导HepG2细胞凋亡,凋亡途径涉及抑制Bcl-2、激活Bax和caspase-3等分子的表达。这为大蒜素作为肝癌治疗的潜在用途提供了实验数据支持。