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不同浓度依托咪酯诱导人肝癌HepG2细胞体外凋亡的研究的中期报告 为了研究不同浓度依托咪酯对人肝癌HepG2细胞体外凋亡的影响,我们进行了实验,并在此发表中期报告,下面是报告内容: 实验方法: 1.细胞培养: 使用DMEM培养基培养HepG2细胞,传代3-6代后进行实验。在37℃和5%CO2下培养。 2.细胞处理: 分为三组,分别加入依托咪酯低浓度组(0.01ug/ml),中浓度组(0.1ug/ml)和高浓度组(1ug/ml)。对照组加入等体积的正常培养基。各组细胞孵育时间为24小时。 3.细胞活性检测: 采用MTT法检测细胞的增殖状况,标准曲线的OD值随细胞数目的变化呈线性增长关系。 4.细胞凋亡检测: 采用Annexin-V和PI法检测凋亡细胞的比例。Annexin-V是凋亡早期标志物,PI是凋亡晚期标志物。依托咪酯处理后细胞用AnnexinV-fluoresceinisothiocyanate(FITC)/PI双染液染色,通过流式细胞仪进行细胞凋亡检测。 实验结果: 1.细胞活性检测: 三组细胞加入不同浓度的依托咪酯后,细胞活性均呈现明显的抑制作用,其中高浓度组的抑制作用最明显,低浓度组的抑制作用最轻。对照组的细胞活性无明显变化。 2.细胞凋亡检测: 三组细胞中,加入依托咪酯的细胞凋亡比例呈剂量依赖性增加,高浓度组的凋亡比例最高,低浓度组的凋亡比例最低。对照组的细胞凋亡比例无明显变化。 结论: 依托咪酯低浓度组,中浓度组和高浓度组对HepG2细胞有明显的凋亡作用,呈现剂量依赖关系。其中高浓度组的凋亡作用最明显,且对细胞增殖也有明显的抑制作用。