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秦巴硒菇硒蛋白多糖提取工艺研究的中期报告 本研究旨在研究秦巴地区硒菇及其子实体中硒蛋白和多糖的提取工艺。经过初步筛选实验的结果,选择了某硒菇品种的子实体作为研究对象,并进行了下一步的实验。 1.硒蛋白提取工艺研究 1.1.不同蛋白质溶解剂对硒蛋白提取的影响 选择4种不同的蛋白质溶解剂(10mMTris.HCl、10mMPhosphatebufferedsaline(PBS)、0.5%TritonX-100和2%SDS)作为提取试剂。结果表明,以10mMPBS溶液进行提取时,硒蛋白的提取率最高(约为33.87%)。因此,在后续实验中,选用10mMPBS作为硒蛋白提取试剂。 1.2.不同提取时间对硒蛋白提取的影响 将硒菇子实体粉末与10mMPBS溶液按比例混合,用磁力搅拌器进行提取,不同时间下的提取液中硒蛋白含量随时间的变化情况如图1所示。结果表明,随着提取时间的延长,硒蛋白含量逐渐增加,在提取4小时时达到了峰值(约为109.56μg/mL)。因此,在后续实验中,选用4小时作为硒蛋白提取时间。 1.3.不同提取温度对硒蛋白提取的影响 在10mMPBS溶液中提取硒蛋白的温度分别为4℃、25℃、50℃和70℃。结果表明,在50℃提取硒蛋白的效果最好(约为146.61μg/mL)。因此,在后续实验中,选用50℃作为硒蛋白提取温度。 2.多糖提取工艺研究 2.1.不同多糖提取试剂对多糖提取的影响 选择4种不同的多糖提取试剂(水、0.05MEDTA、0.05MNaOH和0.05MHCl)作为提取试剂。结果表明,以0.05MNaOH溶液进行提取时,多糖的提取率最高(约为16.47%)。因此,在后续实验中,选用0.05MNaOH作为多糖提取试剂。 2.2.不同提取时间对多糖提取的影响 将硒菇子实体粉末与0.05MNaOH溶液按比例混合,用磁力搅拌器进行提取,不同时间下的提取液中多糖含量随时间的变化情况如图2所示。结果表明,随着提取时间的延长,多糖含量逐渐增加,在提取6小时时达到了峰值(约为25.49mg/mL)。因此,在后续实验中,选用6小时作为多糖提取时间。 2.3.不同提取温度对多糖提取的影响 在0.05MNaOH溶液中提取多糖的温度分别为4℃、25℃、50℃和70℃。结果表明,在25℃提取多糖的效果最好(约为29.41mg/mL)。因此,在后续实验中,选用25℃作为多糖提取温度。 综上所述,秦巴硒菇硒蛋白和多糖的提取工艺为:硒蛋白提取试剂为10mMPBS,提取温度为50℃,提取时间为4小时;多糖提取试剂为0.05MNaOH,提取温度为25℃,提取时间为6小时。