固相萃取-气相色谱-质谱分析肉样中盐酸克伦特罗的残留量.pdf

第30卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第11期

2002年11月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1308～1311

固相萃取2气相色谱2质谱分析肉样中盐酸克伦特罗的残留量

谢孟峡3刘媛蒋敏
(北京师范大学分析测试中心,北京100875)

摘要建立了固相萃取2气相色谱2质谱联机分析肉样中盐酸克伦特罗残留量的方法。对盐酸克伦特罗在

C18和离子交换固相萃取柱上的保留行为进行了研究,发现不同浓度盐酸克伦特罗的固相萃取回收率在75%
～95%之间;肉样中的加标回收率在70%～83%;相对标准偏差在4.95%～13.4%;最低检出限为1μgPkg。盐
酸克伦特罗的硅烷化产物,采用选择离子的模式进行检测(86、243、262、277),衍生物的峰面积与样品浓度在
0.00252～2.02mgPL范围内呈良好的线性关系,线性回归系数大于0.9999。

关键词盐酸克伦特罗,气相色谱2质谱,固相萃取,肉样
1引言

盐酸克伦特罗,又名瘦肉精,是强效选择性β2受体激动剂。人体过量的摄入这种药物会发生中毒,
为此很多国家严禁使用含有此类药物的动物饲料,并制定了其在肉食品中的最高检出限1。对动物肉
食品、体液及毛发中盐酸克伦特罗的检测,一般是先用免疫检测2～5,再用气相色谱2质谱进行定量测
定。固相萃取2气质联用分析尿样、毛发以及饲料中盐酸克伦特罗含量方法国外已开展了一些工
～
作612,但对肉食品中盐酸克伦特罗残留量的检测方法未见报道。

本文用C18和离子交换两种固相萃取柱对猪肉等样品中盐酸克伦特罗的测定方法进行了系统地研

究。考察了盐酸克伦特罗在C18柱和离子交换柱上的保留行为。对不同浓度的盐酸克伦特罗在固相萃
取柱上的回收率进行了测定,建立了用固相萃取2气质联用分析肉样中盐酸克伦特罗的方法。
2实验部分

2.1仪器和试剂
气2质联用仪TRACEMS(美国ThermoQuestFinnigan公司),EI源,电离电压70eV;色谱柱:DB25MS
毛细管柱,30m×0.22mm0.25μm;进样口温度:280℃;源温:200℃;传输线温度:280℃;载气流量:高纯
25℃Pmin25℃Pmin
He,1mLPmin。温度梯度:70℃(1min)200℃(1min)300℃(5min)。无分流进样,进样量

1.0μL。固相萃取柱:C18小柱,supelcleanLC218SupelcoPark500mg,3mL。SCX小柱,supelclean,LC2SCX
SupelcoPark500mg,3mL。
所用溶剂和试剂均为分析纯或色谱纯,盐酸克伦特罗标准品和β2盐酸葡萄糖醛甙酶P芳基硫酸酯酶
(中国药品生物制品检定所),双三甲基硅基三氟乙酰氨BSTFA(美国SupelcoPark公司)。
2.2样品处理
2.2.1样品中克伦特罗的提取准确称取10g绞碎的动物组织于50mL离心试管中,加入20mL20
mmolPL的乙酸胺缓冲溶液(称取一定量的乙酸胺溶解在水中,用乙酸调pH值至5.2),均质5min;加入
50μLβ-盐酸葡萄糖醛甙酶P芳基硫酸酯酶溶液。密封震荡、超声15min后,在37℃恒温箱中培养18h。
离心5min(转速3000rPmin),过滤上清液以备净化。

2.2.2固相萃取净化样品将C18和SCX固相萃取柱按从上到下的顺序安装。依次用5mL甲醇、5mL

水和5mL30mmolPL盐酸活化;取5mL样品溶液上样至C18柱中;依次用5mL水和5mL甲醇淋洗柱子。

在溶剂流过固相萃取柱后,保持抽气5min使柱中液体逐渐枯竭。取下C18柱,用5mL4%氨化甲醇溶液

2001211219收稿;2002205221接受
第11期谢孟峡等:固相萃取2气相色谱2质谱分析肉样中盐酸克伦特罗的残留量9031

淋洗SCX柱并收集流出液。
2.2.3衍生化步骤用氮气吹干上述固相萃取流出液,用100μL甲苯溶解残渣,加入100μLBSTFA在
触摸式震荡器上震荡,80℃衍生1h。蒸去多余溶剂至近干,加入0.5mL甲苯,待气相色谱2质谱分析。
2.3标准溶液的配置及标准曲线
称取25.2mg盐酸克伦特罗标准品定容于100mL甲醇中,得标准溶液母液。用甲醇将母液稀释成
10.1、5.05、1.26、0.126和0.0126mgPL的标准溶液系列。分别取100μL标准溶液,加入100μL衍生化
试剂BSTFA,按上述衍生化步骤衍生和气质分析,每个浓度点衍生3次,每次衍生进样3次。
以标准溶液进样前的浓度(分别为2.02、1.01、0.252、0.0252和0.00252mgPL;若换算成肉样中盐酸
克伦特罗的含量,其线性范围在504～0.63ngPg之间)和组分色谱峰面积做标准曲线。线性