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纳豆激酶的表达与复性研究的综述报告
纳豆激酶是一种厌氧菌体内生成的重要酶类，因其在血凝系统中具有促进凝血的重要功能而被广泛应用。本文主要综述纳豆激酶的表达和复性研究进展。
一、纳豆激酶基础特征
纳豆激酶是一种小分子蛋白酶，分子量为为35kDa，由275个氨基酸组成，两个亚单位连接成一个双分子酶。其活性在体外受多种因素影响，如pH值、离子浓度和温度等。纳豆激酶分子结构具有对称性，采用的是β折叠结构。纳豆激酶的酶活性受粘附到细胞表面的交联蛋白膜的影响，能够短时间内快速激活多种因子，是一种重要的凝血酶。
二、纳豆激酶表达和复性研究
1.纳豆激酶的表达
一直以来，人们尝试研究纳豆激酶的表达和制备，但是由于其自身生长的条件限制，研究受到了较大的难度。为了获取高质量的纯净纳豆激酶，目前主要采用两种方法进行表达：大肠杆菌表达和母细胞真菌表达。
（1）大肠杆菌表达
大肠杆菌表达是利用大肠杆菌作为病毒载体，将纳豆激酶基因转入大肠杆菌，并利用大肠杆菌的胞内环境将纳豆激酶高效表达。由于大肠杆菌能够在常规培养条件下得到较快生长，不受生理条件和时间的限制，使得基因表达效率较高，成功率也相对较高。
（2）母细胞真菌表达
母细胞真菌表达是采用母细胞真菌作为表达载体，与传统的大肠杆菌表达技术相比，母细胞真菌表达可以制备纯度更高、所得产量更大、特异性更好的纳豆激酶，同时也可以实现在原液中存储，便于后续的实验处理。
2.纳豆激酶的复性研究
纳豆激酶是一种重要的凝血因子，可以在体内激活凝血酶，涉及到生理学正常血凝作用的调节。纳豆激酶的酶活性显著依赖于其结构和构象状态，如果在固定的空间位置内发生变化，其活性也会发生相应的变化。因此，纳豆激酶复性研究对于深入了解纳豆激酶在体内活性的变化具有极其重要的作用。
目前，纳豆激酶的复性研究主要采用两种方法：化学阶段法和物理阶段法。
（1）化学阶段法
化学阶段法是将纳豆激酶进行多次疏水化作用，使其亲水性增加，在此过程中不断加入辅助剂，使其不断稳定，最终得到高质量的纯净纳豆激酶。
（2）物理阶段法
物理阶段法是使用多种物理化学手段，如超声波、高压、高温等对纳豆激酶进行处理，以压缩纳豆激酶的构象、调整其一次氧化还原结构，从而达到复性的目的。
三、结论
纳豆激酶是一种重要的凝血酶，可以在体内起到促进血液凝固的作用，对于体外的各种诊断检测和治疗都具有重要的作用。纳豆激酶的复性研究可以帮助我们更好的分析其酶活性和稳定性，为其在医学上的应用提供更广泛的可能性。但是我们也需要注意到，在纳豆激酶制备过程中存在许多难题，例如基因的高效表达、极化技术的改进等，这些都需要不断的研究和改进，以便更好的利用纳豆激酶的益处。