进出口食品中烯肟菌酯残留量的测定_编制说明.doc

《进出口食品中烯肟菌酯残留量的测定》编制说明
一、标准制订的任务来源及意义
任务来源
本检测方法标准的制定工作，是国家认监委下达的2010年科研课题输出检验检疫行业标准计划项目之一，该项制标任务由珠海出入境检验检疫局负责研究和起草。计划编号：2010B287K。
2制订本标准的意义
烯肟菌酯（Enestroburin，SYP-Z071）是国内开发的第一个甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，由沈阳化工研究院1997年开发，已申请了中国、美国、日本及欧洲专利，2002年完成农药临时登记。其结构如下：

该品种具有杀菌谱广、活性高、毒性低，与环境相容性好等特点。烯肟菌酯对由鞭毛菌、结合菌、子囊菌、担子菌及半知菌引起的多种植物病害有良好的防治效果。该药为真菌线粒体的呼吸抑制剂，其作用机理是通过与细胞色素bc1复合体的结合，抑制线粒体的电子传递，从而破坏病菌能量合成，起到杀菌作用。对黄瓜、葡萄霜霉病、小麦白粉病等有良好的防治效果。毒性试验表明烯肟菌酯对雄性大鼠急性经口LD50为1470mg/kg，雌性为1080mg/kg，急性经皮LD50>2000mg/kg，对眼睛轻度刺激，对皮肤无刺激性，皮肤致敏性为轻度。雄、雌大鼠（13周）亚慢性喂饲试验无作用剂量分别为47.73mg/kg/d和20.72mg/kg/d。25%乳油雄性大鼠急性经口LD50为926mg/kg，雌性为750mg/kg，急性经皮LD50>2150mg/kg，对眼睛中度刺激性，对皮肤无刺激性，皮肤致敏性为轻度。目前由于其毒性低，杀菌效果好，大面积推广应用于水稻、小麦、黄瓜、番茄和马铃薯等作物中。虽然各国还没有规定烯肟菌酯的最大残留限量，但是随着烯肟菌酯的大量使用，加强进出口农产品中烯肟菌酯检测，保障进出口贸易顺利进行十分必要。制定进出口食品中烯肟菌酯残留量的检测方法，对于加强检验检疫执法，规范进出口贸易，保障食品安全意义重大。
经调查了解，目前国内没有专门检测烯肟菌酯残留单一成分的行业标准或国家标准。为满足多种类型食品中烯肟菌酯检测的需要，建立食品中烯肟菌酯分析方法的行业标准是非常必要的。本标准方法主要借鉴国际先进的样品前处理和检测技术，建立食品中烯肟菌酯残留量的液相色谱串联质谱测定与确认方法；该方法前处理简单、并采用液相色谱串联质谱仪检测，可同时定性与定量，能满足当前国际贸易和食品安全管理的要求，适用于日常检验工作。
二、编制依据
1．本标准遵守GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》和GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分：化学分析方法》的编写规则及SN/T0001-1995《出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》（以下简称《规定》）。
2．本标准是参考国内、外有关文献的基础上经研究、改进和验证后制定的。
三、方法概述
用乙腈振荡提取试样中残留的烯肟菌酯，经过高速离心后取出1mL提取溶液采用QuEChERS技术净化，高速离心后过0.2μm滤膜，由高效液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。
在样品菜心、黄瓜、番茄、苹果、柑橘、大米、玉米、大豆、虾、猪肉、蜂蜜、茶叶其回收率在72.1%～99.8%之间，变异系数在4.2%～10.4%。最低检测限(LOQ)为0.01mg/kg。其各项指标均符合国际上残留检测的要求。
四、实验技术论证
烯肟菌酯是我国自主开发的农药产品，其化学名称为α-[2-[[[[4-（4-氯苯基）-丁-3-烯-2-基]亚胺基]氧基]甲基]苯基]-β-甲氧基丙烯酸甲酯。结构中存在顺、反异构体（Z体，E体），原药为Z体和E体的混合体。原药（含量≥90%）外观为棕褐色粘稠状物。熔点99℃（E体）；易溶于丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚，微溶于石油醚，不溶于水。对光、热比较稳定。
1样品提取
空白样品中添加一定浓度的烯肟菌酯，样品采用丙酮+正己烷、乙酸乙酯+环己烷+丙酮、乙腈三种不同的溶剂进行提取，比较提取效果。利用此三种液体提取都能达到良好的效果，丙酮、乙酸乙酯提取的色素较重，而乙睛提取的回收率高，同时共提出的杂质也明显较少。实验结果表明25ml乙腈，匀质并振荡提取30min，一次性提取能达到理想的回收率。
2净化
QuEChERS是近年来国际上兴起的快速高效的残留检测前处理技术，已有很多文献报道采用该样品前处理方法进行残留检测，证明这种方法在实验室间取得成功；同时，这种方法也被美国AOAC方法所采纳。该技术采用的固相分散萃取剂主要为PSA（primarysecondaryamine,伯仲胺）、C18和石墨化碳黑。PSA吸附剂能有效去除样本中的脂肪酸、糖类物质等极性基质杂质，C18吸附剂能去除部分非极性脂肪和脂溶性杂质，石墨化碳黑能去除色素和固醇类杂质。试验结果，石墨化碳黑对烯肟菌酯具有吸