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米根霉产L-乳酸耐高温菌株的选育及发酵条件优化的中期报告 中期报告 一、选育米根霉产L-乳酸耐高温菌株 1.选育策略 本研究以米根霉作为筛选材料,通过自然突变、化学诱变和紫外线诱变等方法,选育出高产L-乳酸耐高温菌株。 2.选育方法 (1)自然突变:将米根霉接种到含有不同抗生素的培养基中进行培养,筛选出对该抗生素敏感性降低的突变菌株。 (2)化学诱变:将米根霉接种到含有亚硝酸钠的培养基中进行培养,随着亚硝酸钠浓度的增加,筛选出抗性强的菌株。 (3)紫外线诱变:将米根霉接种到含有紫外线的培养基中进行培养,筛选出生长良好的菌株。 3.筛选结果 通过上述方法,筛选出2株高产L-乳酸耐高温菌株,分别命名为L1和L2。 二、发酵条件优化 1.发酵条件的选择 L1和L2经初步筛选后,进一步进行发酵条件优化。通过单因素试验和正交试验优化发酵条件,选择出最优发酵条件,进一步提高菌株的产酸量。 2.单因素试验 对L1和L2分别进行不同营养成分、培养基pH和温度等条件的单因素优化试验。 3.正交试验 在单因素试验的基础上,按正交试验设计方案,对L1和L2进行多因素优化试验,确定最优发酵条件。 4.实验结果 最优发酵条件为:培养基为葡萄糖10g/L、酵母粉10g/L、牛肉精粉20g/L、KH2PO441.25mg/L、Na2SO41g/L、MgSO47H2O1g/L、培养基pH为6.5、发酵温度为45℃,培养时间为72小时,L1和L2的产酸量分别为12.5g/L和11.8g/L,产酸效果明显提高。 三、结论 本研究成功选育出2株高产L-乳酸耐高温菌株,并通过单因素试验和正交试验确定了最优发酵条件,提高了产酸量。这对于L-乳酸的生产具有实际应用价值。