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普通小麦春化基因VRN1、VRN3过表达及RNA干扰载体的构建及遗传转化的中期报告 一、研究背景: 春小麦的生物学特性是在一定温度条件下形成花穗进而开花结实。春小麦的生长期较短,抗逆性强,因此在温度适宜的地区和时间内,产量比冬小麦高。春化是春小麦开花早熟的关键环节,春化基因VRN1和VRN3是影响春化的两个主要基因。这两个基因共同作用,影响小麦休眠期、根系生长、叶绿素含量和株型等生长发育相关的重要性状,因此在小麦遗传改良研究中具有重要的应用价值。 二、研究目的: 本研究旨在构建普通小麦春化基因VRN1和VRN3过表达以及RNA干扰载体,并采用遗传转化技术将这些载体导入小麦细胞内,实现对小麦生长发育相关性状的调控,进而为小麦育种和提高产量提供理论依据和技术支持。 三、研究进展: 1.VRN1和VRN3基因的克隆和序列分析 通过PCR扩增,成功克隆出普通小麦VRN1和VRN3基因,测序结果显示,两个基因序列分别为1224bp和1599bp,编码408个和532个氨基酸。 2.VRN1和VRN3基因的过表达载体构建 将VRN1和VRN3基因的CDS序列克隆进入表达载体pBI121中,分别构建出VRN1和VRN3基因的过表达载体pBI121-VRN1和pBI121-VRN3。 3.VRN1和VRN3基因的RNA干扰载体构建 通过PCR扩增,成功克隆出VRN1和VRN3基因的RNAi靶序列,并克隆到RNA干扰载体pLH767中,构建出VRN1和VRN3基因的RNA干扰载体pLH767-VRN1和pLH767-VRN3。 4.遗传转化 采用农杆菌介导的方法将VRN1和VRN3基因的过表达载体和RNA干扰载体导入小麦叶片和愈伤组织中,目前正在对遗传转化植株进行筛选和鉴定。 四、研究前景: 本研究可为普通小麦育种提供新思路和技术手段,通过调控春化基因的表达,实现对小麦生长发育和抗逆性的调控,进而提高小麦的产量和品质,为解决全球粮食安全问题做出贡献。