抗hTNF-α单克隆抗体的制备及其抗体基因克隆研究的综述报告.docx

抗hTNF-α单克隆抗体的制备及其抗体基因克隆研究的综述报告
抗hTNF-α单克隆抗体的制备及其抗体基因克隆研究的综述报告
TNF-α是一种细胞因子，它是许多炎症反应和免疫反应的重要调节因子。TNF-α在多种疾病中发挥了重要作用，例如类风湿性关节炎、肌肉萎缩、多发性硬化等。因此，抗TNF-α的单克隆抗体被广泛使用于炎症、自身免疫性和血液肿瘤的治疗。
制备抗hTNF-α单克隆抗体主要有两种方法，一种是混和混合细胞培养法（hybridoma）；另外一种是基于费洛蒙转基因小鼠的方法。
混和混合细胞培养法是制备单克隆抗体的经典方法，其基本原理是将细胞瘤细胞和保持酶抗原活性的免疫细胞融合，以产生带有特定单克隆抗体的杂交瘤细胞。对于制备抗hTNF-α单克隆抗体，通常首先选择一种含有hTNF-α的小鼠抗体做为免疫原，获得对hTNF-α特异性的小鼠抗血清。接着将hTNF-α抗原与小鼠骨髓瘤细胞混合，并加入聚乙二醇（PEG）实现细胞融合。细胞融合后，选择对hTNF-α特异性的单克隆杂交瘤进行筛选、扩增并纯化获得抗hTNF-α单克隆抗体。
利用费洛蒙转基因小鼠制备抗hTNF-α单克隆抗体，是利用基因工程技术，将人类重链和轻链的抗体片段植入鼠基因组，并将其阳性筛选出来，以获得对hTNF-α特异性的单克隆抗体。这种方法优点是可以获得更为高效的单抗和定向的单克隆抗体。
除了制备抗hTNF-α单克隆抗体，抗体基因克隆技术也是很重要的。众所周知，抗体是由轻链和重链两个信息基因编码的抗体组成。利用抗体克隆技术可以将特定的抗体基因从抗原识别的抗体中分离出来，将其定向表达，制备成仅具特定生物学活性的抗体物质。常见抗原基因克隆的方法主要有PCR克隆、V-genePCR和RNA/DNA克隆方法等。
总而言之，抗hTNF-α单克隆抗体的制备和抗体基因克隆技术在药物发展和生物技术研发中具有非常重要的作用。通过以上方法，可以获得具备特异性和高亲和性的单克隆抗体，从而为临床用药和生物技术实验提供了有力的工具。