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鼠抗人CD20单克隆抗体的制备与鉴定的综述报告
CD20是B细胞特异性的跨膜蛋白，广泛表达于B细胞的早期前体细胞和成熟B细胞，对于B细胞发育和免疫应答具有重要作用。在临床上，CD20已经成为治疗B细胞相关疾病的标志性靶标。鼠抗人CD20单克隆抗体已被广泛用于治疗B细胞恶性肿瘤和自身免疫疾病。本文将在制备和鉴定鼠抗人CD20单克隆抗体方面进行综述。
一、鼠抗人CD20单克隆抗体制备
1.免疫原制备
鼠抗人CD20单克隆抗体的制备通常会使用人B细胞系，该细胞系一般选用Raji和Daudi两种细胞系。将细胞系进行培养并收集，用PBS进行洗涤并获得细胞的单细胞悬液。再将悬液进行冻存备用。
2.免疫程序
将制备好的免疫原注射到Balb/c小鼠的腹腔或背部，如需加强免疫效果，可选择使用佐剂强化。最后通过ELISA法检测小鼠血清中IgG的浓度，当IgG浓度达到一定水平时，用小鼠细胞融合技术制备鼠抗人CD20单克隆抗体。
3.小鼠细胞融合技术
通过融合小鼠的骨髓细胞和免疫小鼠的脾细胞，从而制备出杂交瘤细胞。通过筛选和子克隆的方式，最终获得稳定的鼠抗人CD20单克隆抗体细胞株。
二、鼠抗人CD20单克隆抗体鉴定
1.鉴定抗体效价
采用ELISA法和流式细胞术对鼠抗人CD20单克隆抗体进行检测，判断其对免疫原的特异性和亲合性。流式细胞术中，将CD20阳性的Raji和Daudi细胞作为抗原，添加鼠抗人CD20单克隆抗体，然后使用荧光标记的二级抗体进行检测，通过流式细胞术确定抗体的亲和力。
2.鉴定抗体同型异构体
利用SDS-PAGE、westernblot和HPLC等技术，从抗体中分离出单克隆抗体的轻链和重链，进一步检测鼠抗人CD20单克隆抗体的种类和特性。
3.稳定性评价
鼠抗人CD20单克隆抗体的稳定性是非常重要的，可通过长时间放置和储存的试验，或在经过光照、热力、低pH值等不同环境条件下的实验来评估其稳定性。
总之，鼠抗人CD20单克隆抗体的制备和鉴定将有助于治疗B细胞恶性肿瘤和自身免疫性疾病。