PCR扩增目的基因.ppt
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任务二:PCR扩增目的基因一、实验目的二、实验原理标准的PCR过程分为三步:1.模板变性(92℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA2.低温退火(37℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(72℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。.三、实验仪器四、材料与试剂2、TaqDNA聚合酶(5U/μL),10×扩增缓冲液,dNTP(1mmol/L):购买。3、引物(10
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实验三、目的基因的PCR扩增1、掌握PCR反应的基本原理与实验操作技术2、学习PCR扩增仪的使用聚合酶链式反应(PCR)是一种体外DNA扩增技术,具有灵敏度高、特异性强、操作简便和应用广泛等特点。PCR工作原理类似于DNA的体内复制过程,是将待扩增的DNA片段和与其两侧的已知序列合成两个与模板DNA互补的寡核苷酸,将该寡核苷酸作为引物,引物序列将决定扩增序列片段的特异性和片段长度。PCR(聚合酶链式反应)包括3个基本步骤:⑴模板变性(92℃-96℃):目的双链DNA片段在94℃下解链;⑵退火(37℃-65
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会计学一、实验目的:熟悉PCR方法体外扩增DNA的基本原理,掌握PCR技术的常规操作,了解PCR引物及参数的设计。利用PCR扩增的方法获取用于表达的目的基因(jīyīn)(CYP6B6)。二、实验原理:PCR扩增是一种类似于DNA的天然复制过程,以待增的DNA为模板、在体外由引物介导的酶促合成特异性DNA片段的方法。PCR方法(fāngfǎ)体外扩增DNA的基本原理图示预变性(biànxìng)(双链DNA解链)94C,5min(1)引物长度应为15~30个核苷酸,Tm可按下列简单公式(gōngshì)
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