Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的任务书.docx

Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的任务书
任务目标：
本任务的主要目标是将Nanog基因在原核表达下进行表达，重组蛋白进行纯化，并且生成具有高特异性的抗Nanog抗体。
任务描述：
1.设计合适的引物并克隆Nanog基因
根据序列分析，设计适当的引物将Nanog基因扩增，然后将其克隆到原核表达载体中。
2.原核表达重组蛋白
将重组Nanog基因的表达载体转化到大肠杆菌中，利用诱导剂诱导表达重组Nanog蛋白，并通过SDS-PAGE、Westernblot、质谱等方法检测表达的蛋白质量和纯度。
3.蛋白纯化
对表达的蛋白进行纯化，可以采用多种方法，例如亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、逆流层析等方法。通过这些方法可以得到高纯度、高浓度、可溶性的重组Nanog蛋白。
4.抗体制备
以纯化的重组Nanog蛋白作为抗原，免疫兔子或小鼠，收集血清并进行抗体筛选和纯化。通过ELISA、Westernblot、免疫组织化学等方法检测并确认抗体的特异性和亲和力。
成果提交：
提交基因测序数据、表达蛋白的检测数据、蛋白纯化的检测数据、抗体特异性检测数据等相关数据和实验记录。