三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108929370A(43)申请公布日2018.12.04(21)申请号201810808833.9(22)申请日2018.07.15(71)申请人渤海大学地址121013辽宁省锦州市松山新区科技路19号(72)发明人于志鹏樊玥赵文竹曲艾钰(51)Int.Cl.C07K5/087(2006.01)C07K5/09(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图2页(54)发明名称三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽(57)摘要本发明属于生物活性肽领域，特别涉及三种能与血管紧张素转换酶结合、抑制其活性的三肽。本发明所提供的特征性三肽的氨基酸序列分别为FMK，DCL和DWK。本发明借助分子对接技术和多轮虚拟筛选，获得ACE抑制三肽序列，该方法具有特征性强，灵敏度高，操作简单等优点，本发明还同时提供了活性肽的鉴定方法。CN108929370ACN108929370A权利要求书1/1页1.三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽，其特征是，所述鸡蛋源活性肽的氨基酸序列分别为FMK，DCL和DWK。2.根据权利要求1所述的三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽，包括以所述ACE抑制活性的肽序列为核心，任何对其进行的相应的调整或修饰。3.根据权利要求1所述的三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽，其特征是，FMK与ACE(PDBID：1O86)催化位点的氨基酸残基分别为Val518，His513，Lys511，Tyr520，Tyr523，His353，Ala354，Glu384，Thr282，Val380和Glu376；DCL与ACE(PDBID：1O86)催化位点的氨基酸残基分别为His353，Ala354，Glu384，His513，Lys511，Tyr520，His353，Val380和Gln281；DWK与ACE(PDBID：1O86)的催化位点的氨基酸残基分别为Glu411，Tyr523，His357，Phe457，His513，Gln281，Lys511，Trp279，Glu376，Ala354，Glu384和His353。2CN108929370A说明书1/4页三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽技术领域[0001]本发明属于生物活性肽领域，主要涉及三种具有ACE抑制活性的鸡蛋源活性肽。背景技术[0002]生物活性肽是特异性的蛋白质片断，通过有效促进机体功能或状态来改善人类的健康。这些生物活性肽在母蛋白中没有活性，但却能通过蛋白水解或发酵释放出来而产生活性。在体内，这些生物活性肽能够表现多种不同的活性，不仅可改善养分的利用，还可影响心血管、内分泌、免疫以及神经系统。目前已有多种活性肽工业化，日本公司研发的大豆活性肽具有降低胆固醇的作用，谷氨酰胺肽具有免疫调节的作用，具有治疗糖尿病的卵转铁蛋白肽等。长期以来，鸡蛋一直被认为是蛋白质、维生素和矿物质的理想来源。研究发现，相对于乳蛋白活性肽，鸡蛋蛋白为制备活性肽较好的材料，蛋源生物活性肽在预防疾病、保障人体健康方面发挥重要的作用，进而推动人类对于鸡蛋深加工技术的研究。[0003]血管紧张素转化酶(Antiotensin-IConvertingEnzyme，ACE，EC3.4.15.1)是一种广泛分布于生物体内各组织的含锌的二羧肽酶，能被氯离子激活，对人体及哺乳类动物血压和心血管功能起着重要的调节作用，被认为是治疗高血压的一种重要靶标。ACE抑制肽通常是一类具有抑制ACE活性的小肽物质，往往与ACE通过不同方式结合后，抑制了ACE催化无活性的血管紧张素I水解为血管紧张素II的作用，进而起到降低血压的目的。已有报道鸡蛋源酶解产物具有ACE抑制活性，专利(公开号CN101696233A，申请日期2009.10.29)公开了蛋清蛋白血管紧张素转化酶抑制肽及其制备，利用传统经典方法鉴定蛋清蛋白活性肽RVPSL，半抑制浓度(IC50)为0.020mM。这种传统加工方法，虽然能够明确肽的序列，但是存在实验周期长，经费投入大而且一些高活性的肽片段可能被忽略等不足。[0004]本发明利用ACE为靶点开展具有ACE抑制活性的三肽的筛选并获得氨基酸序列，不仅节省时间并且提高经济效益，同时为抗高血压活性肽功能性产品及药物研究提供基础，显著提高了ACE抑制肽的产业化生产及其应用潜力。发明内容[0005]本发明的目的在于提供：一种分离的生物活性三肽FMK，其包括(a)由Phe-Met-Lys所示的氨基酸组成的三肽；(b)或在Phe-Met-Lys所示的氨基酸序列中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性的由(a)衍生的多肽；[0006]一种分离的生物活性三肽DCL，其包括(c)由Asp-Cys-Leu所示的氨基酸组成的三肽；(d)或在