预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/1

在线预览结束,喜欢就下载吧,查找使用更方便

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

BAFF受体TACI融合蛋白的表达纯化与功能研究的中期报告 本研究旨在表达、纯化和功能鉴定BAFF受体TACI融合蛋白。在研究的中期阶段,已完成了以下工作: 1.构建TACI融合蛋白的表达载体 利用PCR技术从人类TACI基因中扩增出TACI基因的编码区域,并将其克隆到pET28a(+)载体中,构建TACI-His融合蛋白表达载体,同时添加了添码子以增强其表达。 2.表达TACI-His融合蛋白 将表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)细胞中,经IPTG诱导表达后,利用SDS-PAGE检测到预期大小的重组蛋白(约为35kDa)的表达。 3.纯化TACI-His融合蛋白 利用亲和层析柱结合Ni2+离子的亲和性,通过蛋白质纯化,得到了具有高纯度的TACI-His融合蛋白。 4.鉴定纯化蛋白 通过Westernblotting检测,发现仅在含有His标签的样品中出现明显的特异性条带,证明成功地纯化了TACI-His融合蛋白。 5.进行蛋白质交互作用实验 利用Westernblotting和ELISA检测了TACI-His融合蛋白与BAFF相互作用,并发现TACI-His融合蛋白能够特异性地结合BAFF,表明其具有功能性活性。 结论:在研究的中期阶段,我们成功地表达和纯化了TACI-His融合蛋白,并证明其与BAFF具有特异性的相互作用。这为我们深入研究TACI与BAFF之间的相互作用提供了有力的实验条件。