检测腹泻病毒的核酸组合物、试剂盒及试剂盒的使用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109593890A(43)申请公布日2019.04.09(21)申请号201811643012.0(22)申请日2018.12.29(71)申请人深圳市刚竹医疗科技有限公司地址518051广东省深圳市南山区西丽街道茶光路1089号深圳集成电路设计应用产业园511-1(72)发明人罗成(74)专利代理机构广州华进联合专利商标代理有限公司44224代理人潘霞(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/686(2018.01)C12N15/11(2006.01)C12R1/93(2006.01)权利要求书2页说明书9页序列表5页附图1页(54)发明名称检测腹泻病毒的核酸组合物、试剂盒及试剂盒的使用方法(57)摘要本发明涉及一种检测腹泻病毒的核酸组合物、试剂盒及试剂盒的使用方法。该检测腹泻病毒的核酸组合物包括扩增引物对及与扩增引物对应的检测探针。上述检测腹泻病毒的核酸组合物至少能够同时检测A组轮状病毒、B组轮状病毒、C组轮状病毒、诺如病毒、诺如病毒I型、诺如病毒II型、札如病毒、星状病毒和肠道腺病毒中的三种，并且检测灵敏度高、特异性好。CN109593890ACN109593890A权利要求书1/2页1.一种检测腹泻病毒的核酸组合物，其特征在于，包括扩增引物对及与所述扩增引物对应的检测探针；所述扩增引物对包括如下扩增引物对中的至少三种：序列如SEQIDNo.1及SEQIDNo.2所示的A组轮状病毒扩增引物对、序列如SEQIDNo.3及SEQIDNo.4所示的B组轮状病毒扩增引物对、序列如SEQIDNo.5及SEQIDNo.6所示的C组轮状病毒扩增引物对、序列如SEQIDNo.7及SEQIDNo.8所示的诺如病毒扩增引物对、序列如SEQIDNo.9及SEQIDNo.10所示的诺如病毒I型扩增引物对、序列如SEQIDNo.11及SEQIDNo.12所示的诺如病毒II型扩增引物对、序列如SEQIDNo.13及SEQIDNo.14所示的札如病毒扩增引物对、序列如SEQIDNo.15及SEQIDNo.16所示的星状病毒扩增引物对、和序列如SEQIDNo.17及SEQIDNo.18所示的肠道腺病毒扩增引物对；与所述扩增引物对对应的检测探针的序列或其互补序列分别如SEQIDNo.19～SEQIDNo.27所示，所述检测探针上连接有荧光基团。2.根据权利要求1所述的检测腹泻病毒的核酸组合物，其特征在于，所述扩增引物对包括所述A组轮状病毒扩增引物对、所述B组轮状病毒扩增引物对、所述C组轮状病毒扩增引物对、所述诺如病毒扩增引物对、所述诺如病毒I型扩增引物对、所述诺如病毒II型扩增引物对、所述札如病毒扩增引物对、所述星状病毒扩增引物对、和所述肠道腺病毒扩增引物对；所述扩增引物对为多组，同一组内的不同扩增引物对的检测探针上的荧光基团不同。3.根据权利要求2所述的检测腹泻病毒的核酸组合物，其特征在于，所述扩增引物对为三组；其中，第一组包括所述A组轮状病毒扩增引物对、所述B组轮状病毒扩增引物对和所述C组轮状病毒扩增引物对；第二组包括所述诺如病毒扩增引物对、所述诺如病毒I型扩增引物对和所述诺如病毒II型扩增引物对；第三组包括所述札如病毒扩增引物对、所述星状病毒扩增引物对和所述肠道腺病毒扩增引物对。4.根据权利要求3所述的检测腹泻病毒的核酸组合物，其特征在于，各组内的各所述检测探针上的荧光基团选自FAM、HEX、VIC、CY5及ROX中的一种。5.根据权利要求4所述的检测腹泻病毒的核酸组合物，其特征在于，所述第一组内的对应的检测探针上的荧光基团分别为FAM、HEX和ROX；所述第二组内的对应的检测探针上的荧光基团分别为FAM、HEX和ROX；所述第三组内的对应的检测探针上的荧光基团分别为FAM、HEX和ROX。6.根据权利要求1～5任一所述的检测腹泻病毒的核酸组合物，其特征在于，所述核酸组合物还包括序列如SEQIDNo.28及SEQIDNo.29所示的内标引物对和与所述内标引物对对应的检测探针，所述与所述内标引物对对应的检测探针的序列或其互补序列如SEQIDNo.30所示，所述与内标引物对对应的检测探针上连接有与所述扩增引物对对应的检测探针不同的荧光基团。7.一种检测腹泻病毒的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～6任一项所述的检测腹泻病毒的核酸组合物。8.根据权利要求7所述的检测腹泻病毒的试剂盒，其特征在于，还包括PCR反应缓冲液、RNA提取试剂、PCR稳定剂及PCR增强剂中的至少一种。9.一种检测腹泻病毒的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：提取待测样本的核酸，得到核酸样本；2CN109593890A权利要求书2/2页以所述核酸样本为模板，加入权利要求7