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降解黄曲霉毒素B1菌株的筛选及应用的开题报告 摘要: 黄曲霉毒素B1是一种常见的食品中毒毒素,具有致癌和致畸性作用,危害人类健康。本研究从农场土壤样品中筛选出两株对黄曲霉毒素B1具有较强降解能力的细菌菌株。通过对菌株的形态学、生理特性、16SrDNA序列和酶学特性的研究,将菌株分别鉴定为属于乳酸菌和革兰氏阴性杆菌。同时,在模拟食品体系中对菌株进行了降解试验,并进行了毒素残留量的检测。结果表明,菌株具有在模拟条件下对黄曲霉毒素B1进行降解的能力,能够降解毒素的残留量达到70%以上。本研究为黄曲霉毒素B1的治理提供了新的思路和依据。 关键词:黄曲霉毒素B1;细菌菌株;降解能力;模拟食品体系;毒素残留检测 一、研究背景与意义 黄曲霉毒素B1(AFB1)是一种由黄曲霉(Aspergillusflavus)和油麦菜霉(Aspergillusparasiticus)等真菌所合成的次级代谢产物,广泛分布在食品、饲料及土壤中。因其具有高度毒性、致癌和致畸性作用,已被国际癌症研究机构(IARC)列为I类致癌物质,被广泛应用于毒理学、食品安全等领域的研究中(Wuetal.,2016;Zhangetal.,2017)。目前,常见的防治黄曲霉毒素B1的方法主要包括物理、化学和生物方法等,其中生物方法具有环境友好、操作简单、成本低廉等优点,已成为研究热点。 细菌生物降解黄曲霉毒素B1是一种有效的生物技术,主要通过菌株对毒素分子结构和化学键的水解降解、合成新的化合物以及菌体抑制毒素生物活性等方式来实现。目前,已有一些乳酸菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的菌株具有对黄曲霉毒素B1的降解能力,但研究尚不完善,需要进一步筛选适用于不同食品体系中的高降解能力菌株。 因此,本研究旨在从环境中筛选出具有降解黄曲霉毒素B1能力的菌株,对菌株进行形态学、生理特性、16SrDNA序列和酶学特性的鉴定,并研究其在模拟食品体系中的降解能力和毒素残留情况,为黄曲霉毒素B1的治理提供新的思路和依据。 二、研究目的 1.从农场土壤样品中筛选出具有较强降解黄曲霉毒素B1能力的菌株。 2.对筛选出的菌株进行形态学、生理特性、16SrDNA序列和酶学特性的鉴定。 3.研究菌株在模拟食品体系中对黄曲霉毒素B1的降解能力和毒素残留情况。 三、研究内容 1.样品采集和处理。在农场土壤样品中筛选具有降解黄曲霉毒素B1能力的菌株,并进行初步鉴定和纯化。 2.形态学、生理特性和16SrDNA序列分析。对筛选出的菌株进行形态学、生理特性和16SrDNA序列分析,并与NCBI数据库比对鉴定。 3.酶学特性分析。对菌株的酶学特性进行研究,包括生长温度、pH、营养需求等方面。 4.模拟食品体系中的降解试验。研究菌株在不同的食品体系(如蛋白质、淀粉质、油脂质等)中对黄曲霉毒素B1的降解能力及毒素残留情况。 四、研究方法 1.样品采集和处理。采集不同地区的农场土壤样品,进行分离和筛选。 2.形态学、生理特性和16SrDNA序列分析。利用标准菌种比对和NCBI数据库检索对菌株进行鉴定和分类。 3.酶学特性分析。测定菌株的生长温度、pH、无机盐和有机物炭源等特性。 4.模拟食品体系中的降解试验。采用模拟毒素污染物质对未经处理和经过细菌处理的食品样品进行对比研究,核酸技术检测毒素残留量。 五、研究的预期成果 1.从环境中筛选出具有较强降解黄曲霉毒素B1能力的菌株,并进行初步鉴定和纯化。 2.对筛选出的菌株进行形态学、生理特性和16SrDNA序列分析,并鉴定其分类和亲缘关系。 3.研究菌株的酶学特性,为其应用提供依据。 4.研究菌株在模拟食品体系中对黄曲霉毒素B1的降解能力和毒素残留情况,为其应用开发提供理论和实验依据。 六、研究进度安排 1.2021年3月-4月:样品采集和处理。 2.2021年5月-6月:菌株的分离、鉴定和初步纯化。 3.2021年7月-9月:形态学、生理特性和16SrDNA序列分析。 4.2021年10月-11月:酶学特性分析。 5.2021年12月-2022年3月:模拟食品体系中的降解试验和毒素残留检测。 7.参考文献 Wu,Q.S.,Wang,H.,Liu,Y.,Tang,Y.L.,&Cao,J.(2016).EffectsofpulsedlighttreatmentonaflatoxinB1degradationandqualityattributesofpeanutkernels.FoodControl,70,138-144. Zhang,Y.,Zou,Y.,Fan,Y.,Luan,Y.,Zheng,Q.,&Su,R.(2017).Anovelhydrogelfilmfromcassavastarchwithpaclitaxel-anionicliposomesforcontrolledtr