罗汉果甜苷的提取工艺方案.pdf

罗汉果甜苷的提取工艺方案

一、设计背景
罗汉果，别名拉汗果、假苦瓜、光果木鳖、金不换、罗汉表、裸龟巴，被人们誉
为“神仙果”，为葫芦科植物罗汉果的干燥果实。其叶心形，雌雄异株，夏季开花，秋
天结果。主要产于广西壮族自治区桂林市永福县龙江乡、龙胜和百寿等镇，罗汉果是
桂林名贵的土特产，也是国家首批首批公布的药食两用名贵中药材。罗汉果其主要功
效是清热润肺，利咽开音，滑肠通便。主治用于肺热燥咳，咽痛失音，肠燥便秘。
罗汉果甜苷又称罗汉果甜甙或罗汉果甜，是提取于罗汉果的一种物质，可用于食
品添加剂及药物添加剂。罗汉果甜苷具有润肺镇咳、不影响血糖、预防龋齿、祛痰、
清除自由基和抗氧化、增强免疫和抗癌的作用。罗汉果含罗汉果甜苷，较蔗糖甜300
倍，另含果糖、氨基酸、黄酮等。果中含非糖甜味的成分，主要是三萜甙类：罗汉果
甙Ⅴ及罗汉果甙Ⅳ，罗汉果甙Ⅴ的甜度是蔗糖的256-344倍，罗汉果甙Ⅳ的甜度为蔗
糖的126倍；次要的是D-甘露醇，其甜度为蔗糖的0.55-0.65倍。还含大量葡萄糖，
果糖占14%。又含26种无机元素、蛋白质、维生素C等。种仁含油脂41.07%。罗汉
果甜苷作为食品是安全无毒的，在国家强制标准《GB2760食品添加剂使用标准》中
规定，罗汉果甜苷可不限量用于各类食品。
罗汉果中葫芦素烷三萜类是主要有效成分，除少数外，均为甜味或者微甜物质，
而其中罗汉果甜苷中的罗汉果甜苷Ⅴ是主要的甜味成分。罗汉果甜苷与其它甜味剂相
比，有天然甜味，高甜度，无热量，溶解性强，无沉淀，防龋齿，无毒，热稳定性好，
是作为天然甜味剂开发之一。目前，罗汉果甜苷可以根据各类食品的生产需求适量使
用，并不会引起血糖的升高，糖尿病患者可食用，对于儿童食品，也不会引起龋齿，
是一类很好的甜味剂；且具有清热润肺镇咳，润肠通便的功效。
二、设计依据
本设计方案运用了简单溶剂提取法，有机溶剂萃取法和大孔吸附树脂分离技术，
从而实现了从罗汉果中提取罗汉果甜苷。
简单溶剂提取法：溶剂为纯净水，被提取物为粉碎后的罗汉果干果，在一定的温
度和时间下进行加热提取，得到提取液。
有机溶剂萃取法：运用萃取的方式，将罗汉果中存在的的杂质（脂溶性杂质和水
溶性杂质）萃取出来，以此保证罗汉果甜苷的纯度。
大孔吸附树脂分离技术：将大孔树脂经过预处理后，之前得到的粗品通过大孔树
脂柱，在规定好的梯度下，逐步进行洗柱，会得到洗脱液，之后将大孔树脂先后通过
酸和碱，至中性后，完成再生。
本设计方案是通过这三种原理进行的，得到的罗汉果甜苷为淡黄色粉末。主要参
照教材《药物制剂技术》、《药品生产质量管理规范》、《生物制药工艺学》和《中
国药典》（2020版）共同制定。
三、设计方案
（一）提取工艺流程图
真空干燥粉碎过滤
鲜罗汉果罗汉果干果提取液滤液
水加热提取

石油醚脱脂、脱色水饱和的正丁醇旋蒸
一次萃取液二次萃取液罗汉果甜苷粗品

大孔树脂、乙醇减压浓缩
洗脱液罗汉果甜苷纯品
真空干燥
图1.提取工艺流程图
（二）提取步骤
1．取新鲜罗汉果21kg进行真空干燥，得到6kg罗汉果干果，将得到的6kg罗汉
果干果进行粉碎，粉碎后加入30L体积的纯净水，在95℃～100℃的温度下，时间为
12h的条件下进行提取，得到提取液A。
2．将需要用到的大孔吸附树脂分离技术的D-101树脂进行预处理：D101树脂用
乙醇浸泡4h，再用乙醇洗至流出液与水1：5不浑浊，用水洗至该树脂没有乙醇味道，
5%HCl通过树脂柱浸泡4h，再用水洗至PH试纸检测是中性，加入2%NaOH通过树
脂柱浸泡24h，最后用水洗至PH试纸检测为中性，放置备用。
3．待提取液A温度下降至40℃～50℃时，先后通过板框过滤机和超滤进行过滤，
得到滤液B。
4．待滤液B温度降至室温时，加入亲脂性有机溶剂石油醚60kg，在离心萃取机
的操作下，萃取3～5次，静止3～5小时完成脱脂脱色。得到去除油脂、色素等脂溶
性杂质的一次萃取液C。
5．在一次萃取液C中加入30L水饱和的正丁醇，再次利用离心萃取机进行萃取，
萃取2～3次，静止2～3小时，除去其它水溶性杂质得到二次萃取液D。
6．将二次萃取液D利用旋转蒸发器进行旋蒸，回收正丁醇，得到罗汉果甜苷的
粗品Q。
7．将粗品Q上已经经过预处理好后的D-101大孔树脂柱进行吸附，先用一倍柱
体积的25%乙醇水溶液（乙醇：水=1:4）进行洗柱，再用三倍柱体积的50%乙醇水溶
液（乙醇：水=1:1）进行洗柱，最后用三倍至五倍柱体积的无水乙醇进行柱洗脱，得
到洗脱液。
8．对完成分离后的大孔树脂柱进行洗脱，先用清水洗柱，用于除去内部或者表
面残留或存在的杂质，再用所选的洗脱剂30%的乙醇在30℃的温度下进行洗脱。
9．完成洗脱后的D-101树脂进行再生，95%的乙醇洗脱至无色