高效液相色谱柱常见故障.doc

一、高效液相色谱柱常见故障表1高效液相色谱柱常见故障的判断及排除现象判断排除方法1.柱压高于正常值（1）柱端过滤器堵塞（1）拆下过滤器用硝酸超声清洗（2）长期使用柱端固定相板结（2）挖掉板结部分修补柱端（3）分析生化、染料等易污染固定相（3）采用保护柱的样品2.柱压低于正常值某连接处泄漏高压查找泄漏处，拆下柱子适当拧紧或衬聚四氟乙烯薄膜3.塔板数下降（1）超龄服役（1）柱再生成换柱（2）柱被污染（2）清洗二、根据色谱图的变化判断仪器故障表2根据色谱图的变化判断仪器故障或方法失误故障现象可能的原因排除方法进样后不出峰（1）检测器选择不当，样品无吸收（1）正确选择检测器，如样品无紫外吸收就不应选UV检测器，而应选其它的检测器（2）试样溶液浓度太低，而检测灵敏（2）应适当提高样品浓度和进样量，并度不高提高检测灵敏度（3）检测器到记录仪之间的输入信号（3）修理接好信号并将灵敏度调到适宜线连接不好或断开的位置（4）记录仪的信号线接错（4）检查接线，并正确连接（5）进样用注射器堵塞后泄漏，使样（5）修理注射器或更换新注射器品溶液不能进入进样阀进样不出峰或者峰高不正常（1）注射器泄漏（1）更换新注射器（2）阀转子上针头密封垫磨损导致泄露（2）更换新的零件（3）选用的注射器针头与阀不匹配（3）更换合适的针管（4）定子与转子接触密封面损坏引起内（4）损坏不严重时经重新研磨，使之恢通道断路复性能，否者更换新的转子（5）定量管堵塞（5）设法打通，或者换新的出现无名峰（1）转子针头密封垫及进样针导管污染（1）清洗阀的样品通路（2）阀样品通路清洗不干净（2）方法同（1）峰形拖尾（1）定体积量管与阀连接处出现死区（1）更换新管消除死区（2）进样器内有污染或不干净（2）可选用2：1：4的硫酸-硝酸-水的混合溶液清洗，接着用蒸馏水清洗，然后用丙酮或乙醚等溶剂清洗，烘干（3）色谱柱选择不当，试样与固定相（3）更换色谱柱间有作用（4）进样技术差（4）提高进样技术（5）样品在流动中相中溶解度小（5）选用对试样溶解能力强的溶剂作为流动相（6）进样量太大（6）减少进样量（7）色谱柱与阀的连接管连接处出现死区（7）重新装柱或更换分离度变差（1）柱端固定相反结（1）挖掉修补、重填固定相（2）柱端床层塌陷（2）修补柱端（3）柱子寿命已到（3）更换新柱（4）进样量过大（4）减少进样量（5）样品浓度过大（5）减少配样浓度（6）试样溶解不完全（6）换溶剂使其完全溶解（7）试样粘度大（7）减少进样量，降低进样浓度（8）色谱柱污染柱效下降（8）更换柱子或以级性溶剂冲洗保留时间不重复（1）更换流动相对旧流动相未完全被顶（1）延长平衡时间替绰（2）正相柱中流动相脱水不完全（2）重新脱水（3）柱温变化（3）柱恒温（4）缓冲液容量不够（4）用较浓的缓冲液（5）柱内条件变化（5）稳定进样条件，调节流动相（6）柱塌陷或形成短路通道（6）更换色谱柱出现无规则色谱峰长期进样滞留在柱中的组分被洗脱用强极性溶剂冲洗再用流动相平衡平顶峰（1）色谱柱超载（1）减少进样量（2）记录仪灵敏度过高（2）适当降低记录仪的灵敏度（3）记录仪机械部分有故障（3）参照有关说明进行修理（4）记录仪接收的信号超过了测量范围（4）改变记录仪量程（5）检测池及其透镜、池窗等光学附件（5）清洗检测池以及透镜、池窗等光学污染附件出负峰（1）记录仪或检测器极性接反（1）纠正极性连接错误（2）用示差折光检测器检测时，样品的（2）若要得到正峰，可改变检测器或记折光指数小于流动相溶剂的折光指数录仪的极性（3）使用的流动相不纯净（3）使用纯净的流动相（4）样品池与参比池接反（4）掉换（5）进样故障（5）使用进样阀，确认在进样期间样品环中没有气泡（6）光电池与放大器接错（6）检查后正确连接（7）用UV检测器时，溶解样品所用的溶（7）应尽量采用能与流动相溶剂互溶的剂与流动相溶剂不能互溶或两溶剂溶剂来溶解样品，最好用流动相作pH值不同。当溶剂流过检测池时，为样品溶剂光在两种互不溶溶剂的界面上产生折射，从而使光电池接受到不同强度的光，光强度减弱，以至于低于，参比也可出负峰。色谱峰未分开（1）色谱柱分离度低，柱效不高（1）选择高效柱或重装柱（2）色谱柱或色谱条件（溶剂、检测器、（2）再行试验选择最佳色谱柱分离条件温度、流速、柱子等）选择不当（3）柱子过载（3）减少进样量或采用“再循坏分离”技术（4）流动相流速过大（4）适当降低流速（5）柱中填料流失过多，增加了柱外效应（5）更换色谱主（6）进样技术不佳（6）提高进样技术基线不能回零（1）样品粘度大（1）适当减小样品浓度，并采用低粘度流动相溶剂（2）进样量太大，柱超载（2）减小进样量（3）溶解样品的溶剂与流动相溶剂互溶（3）尽量采用能互溶的溶剂来溶解试样（4）柱效低，柱内空隙（4）改用高效柱或重新装柱（5