一种藻油DHA提取制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105670771A(43)申请公布日2016.06.15(21)申请号201610108615.5C11B3/12(2006.01)(22)申请日2016.02.26(71)申请人深圳市荣格保健品有限公司地址518116广东省深圳市龙岗区龙岗街道宝龙社区宝龙二路3号京能工业园1号厂房第3层302(72)发明人于荣贤刘兵余玉芳张勇李建方翠孙小玲孙会喜(74)专利代理机构佛山市广盈专利商标事务所(普通合伙)44339代理人杨乐兵杨琳(51)Int.Cl.C11B1/04(2006.01)C11B1/10(2006.01)C11B3/00(2006.01)C11B3/10(2006.01)权利要求书3页说明书8页附图1页(54)发明名称一种藻油DHA提取制备方法(57)摘要本发明公开了一种藻油DHA提取制备方法，其包含如下步骤：(1)将寇氏隐甲藻进行培养和发酵；(2)干燥；(3)破壁预处理；(4)微藻DHA提取；(5)尿素包合富集纯化；将步骤(4)得到的微藻油脂通过尿素包合法富集纯化DHA；得到微藻DHA藻油；(6)脱色除臭；将尿素包合富集纯化所得的微藻DHA藻油加入占油体质量3％的活性白土进行脱色，脱色温度为80℃，脱色时间为45分钟，同时抽真空并适度搅拌，过滤除去白土，对油脂进行水蒸气气提除臭，汽提温度为85℃，真空度为0.30Kpa，脱臭时间为1小时，然后维持真空状态下缓慢冷却，离心得藻油DHA成品。CN105670771ACN105670771A权利要求书1/3页1.一种藻油DHA提取制备方法，其特征在于，包含如下步骤：(1)将寇氏隐甲藻进行培养和发酵；所述培养和发酵为藻种培养和异养发酵，得到微藻原料；(2)干燥；将步骤(1)得到的微藻原料进行干燥处理，得到微藻粉末；(3)破壁预处理；将步骤(2)得到的微藻粉末采用超声处理法进行微藻破壁预处理，得到微藻干粉；(4)微藻DHA提取；将步骤(3)得到的微藻干粉采用索氏提取法和/或超临界二氧化碳萃取法进行微藻DHA提取，得到微藻油脂；(5)尿素包合富集纯化；将步骤(4)得到的微藻油脂通过尿素包合法富集纯化DHA；得到微藻DHA藻油；(6)脱色除臭；将尿素包合富集纯化所得的微藻DHA藻油加入占油体质量3％的活性白土进行脱色，脱色温度为80℃，脱色时间为45分钟，同时抽真空并适度搅拌，过滤除去白土，对油脂进行水蒸气气提除臭，汽提温度为85℃，真空度为0.30Kpa，脱臭时间为1小时，然后维持真空状态下缓慢冷却，离心得藻油DHA成品。2.如权利要求1所述的一种藻油DHA提取制备方法，其特征在于，所述步骤(1)包含准备培养基以及异氧发酵的过程；所述准备培养基包含,(S11)固体培养基：培养基组成：葡萄糖50g，味精30g，酵母膏6g，氯化钠8g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml，纯净水1000ml；琼脂2％；(S12)一级种子培养基：培养基组成：葡萄糖20g，味精10g，酵母膏2g，氯化钠8g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml，纯净水1000ml；(S13)二级种子培养基：培养基组成：葡萄糖40g，味精20g，酵母膏4g，氯化钠8g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml，纯净水1000ml；(S14)发酵培养基：培养基组成：葡萄糖50g，味精30g，酵母膏6g，氯化钠8g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml，纯净水1000ml；(S15)菌种保藏培养基：所述固体培养基或发酵培养基中添加有青霉素，添加量为50～100mg/L，并低温保藏。3.如权利要求2所述的一种藻油DHA提取制备方法，其特征在于：所述菌种保藏培养基为用于保藏寇氏隐甲藻的固体培养基。4.如权利要求2所述的一种藻油DHA提取制备方法，其特征在于：所述异养发酵包含如下步骤，(S21)一级种子培养：从固体培养基的平板上取一定量纯的寇氏隐甲藻，接种到一级种子培养基，置于摇床上，28℃、120rpm条件下培养48小时，得到一级种子；(S22)二级种子培养：2CN105670771A权利要求书2/3页将一级种子按20％的接种量转接到二级种子培养基，28℃、150rpm条件下培养48小时，得到二级液体种子；(S23)发酵培养：取5L标准发酵罐，自动调控温度、pH、溶氧、搅拌速度、通风量和流加速度；发酵条件为：将二级液体种子按4％接种量接种于发酵培养基中，在25℃和4L/min的通气量下培养；每12h取样，测定葡萄糖浓度、生