一种新型荧光探针及其制备方法和在检测尿酸中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107163068A(43)申请公布日2017.09.15(21)申请号201710316865.2(22)申请日2017.05.08(71)申请人辽宁大学地址110000辽宁省沈阳市沈北新区道义南大街58号(72)发明人王君杨帆刘逸伦张朝红宋有涛任佩佩刘冠宏(74)专利代理机构沈阳杰克知识产权代理有限公司21207代理人金春华(51)Int.Cl.C07F5/00(2006.01)C09K11/06(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图5页(54)发明名称一种新型荧光探针及其制备方法和在检测尿酸中的应用(57)摘要本发明公开了一种新型荧光探针及其制备方法和在检测尿酸中的应用。取二乙三胺五乙酸，乙酸酐，吡啶，在65℃下搅拌加热24h，冷却，过滤，洗涤，干燥，得到的二乙三胺五乙酸二酐与三乙胺，DMF，2,6-二氨基嘌呤，混合均匀，恒温100℃加热搅拌24h，冷却，过滤，干燥，得到的二乙三胺五乙酸-双(2,6-二氨基嘌呤)溶解于pH＝7.4的Tris-HCl缓冲溶液中，与Tb(NO3)3·6H2O混合，过滤，滤液加热或长时间放置，得目标产物。将TbШ-dtpa-bis(2,6-Diaminopurine)作为探针结合荧光方法检测尿酸。本发明方法简单新颖，效率高，成本低,且可应用在实际尿样当中。CN107163068ACN107163068A权利要求书1/1页1.一种新型荧光探针，其特征在于，所述的荧光探针是TbШ-dtpa-bis(2,6-Diaminopurine)。2.权利要求1所述的新型荧光探针的制备方法，其特征在于，方法如下：1)二乙三胺五乙酸、乙酸酐和吡啶，混合均匀，在60-70℃下，搅拌加热22-25h，冷却至室温，过滤，用乙酸酐和无水乙醚洗涤，抽滤，干燥，得二乙三胺五乙酸二酐(dtpaa)；2)二乙三胺五乙酸二酐、三乙胺、无水DMF和2,6-二氨基嘌呤，混合均匀，于95-105℃下，搅拌加热22-25h，静置，冷却到室温，过滤，真空干燥，得二乙三胺五乙酸-双(2,6-二氨基嘌呤)(dtpa-bis(2,6-Diaminopurine))；3)将二乙三胺五乙酸-双(2,6-二氨基嘌呤)用pH＝7.4的Tris-HCl缓冲溶液溶解，得dtpa-bis(2,6-Diaminopurine)溶液，与Tb(NO3)3·6H2O混合，过滤，滤液于70-80℃下加热20-30min或于室温下放置1-2天，得TbIII-dtpa-bis(2,6-Diaminopurine)。3.如权利要求2所述的新型荧光探针的制备方法，其特征在于：步骤1)，用于反应过程的乙酸酐的加入量为，按摩尔比，二乙三胺五乙酸:乙酸酐:吡啶＝1:4:6。4.如权利要求2所述的新型荧光探针的制备方法，其特征在于：按摩尔比，二乙三胺五乙酸二酐:三乙胺:2,6-二氨基嘌呤＝1:3:2。5.如权利要求2所述的新型荧光探针的制备方法，其特征在于：按质量比，二乙三胺五乙酸-双(2,6-二氨基嘌呤):Tb(NO3)3·6H2O＝1:0.8-0.85。6.权利要求1所述的新型荧光探针在检测尿样中的应用。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的新型荧光探针应用于尿样中尿酸的检测。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，方法如下：取尿液，加入权利要求1所述的新型荧光探针TbШ-dtpa-bis(2,6-Diaminopurine)的pH＝7.4的Tris-HCl缓冲溶液，搅拌均匀，在241nm的激发波长下观察荧光光谱的变化。9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，方法如下：取尿液0.5mL于50mL容量瓶中，加入5mL浓度为5.0×10-4mol/L的权利要求1所述的新型荧光探针TbШ-dtpa-bis(2,6-Diaminopurine)的pH＝7.4的Tris-HCl缓冲溶液，用Tris-HCl缓冲溶液定容，在241nm的激发波长下观察荧光光谱的变化。2CN107163068A说明书1/5页一种新型荧光探针及其制备方法和在检测尿酸中的应用技术领域[0001]本发明属于分析化学领域，尤其涉及新型荧光探针的合成及其对尿酸的检测。背景技术[0002]尿酸在人体中是嘌呤的最终代谢产物，在人体尿液以及血液中，尿酸含量的检测都是非常重要的指标。通常而言，在人体尿液中尿酸的正常浓度应该为1.49-4.46mmol/L，通过各种生物过程维持自身平衡。当尿酸的生成量和排泄量不平衡时，其尿酸的氧化产物嘌呤碱就会发生代谢紊乱，从而导致高尿酸症、痛风、Lesch-Nyhan综合症，如肾脏损伤、白血病、高血压、糖尿病以及高尿酸症等等。白血病患者在1d内尿酸最大排泄量可达12g，