基因工程的下游技术 重组蛋白的表达、纯化和分析.ppt
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基因工程的下游技术 重组蛋白的表达、纯化和分析.ppt
基因工程的下游技术重组蛋白的表达、纯化和分析重组蛋白的表达表达体系:表达载体原核受体细胞真核选择表达载体常用的关键元件:启动子和调节序列(表达强弱、细胞或组织特异性、表达调节等,如本实验的乳糖操纵子。)融合基因(纯化、标签,或增强蛋白可溶性等。如多聚His标签-6×His,便于镍柱亲和层析纯化。GST融合蛋白用GST柱亲和层析)分泌信号筛选标记其它重组蛋白的纯化亲和层析离子交换层析凝胶过滤层析……本单元实验流程:细菌(pEF-GFPuv)实验十重组DNA在大肠杆菌中的诱导表达实验目的实验原理材料与试剂实验
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编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径学海无涯苦作舟页码:重组蛋白和多肽的分离纯化1.概述分离纯化组成了基因工程的下游处理(downstreamprocessing)阶段这一过程又和上游过程紧密相联系上游过程的诸方面影响到下游的分离纯化所以在进行目标蛋白质表达纯化时要统一考虑和整体设计并充分考虑上游因素对下游的影响如是否带有亲和标签是否进行分泌表达。目前应用最广泛的表达系统有三大类分别是大肠杆菌表达系统、酵母表达系统和CHO细胞表达系