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浙江大学 硕士学位论文 山药多糖提取工艺优化及结构分析 姓名:吴丹 申请学位级别:硕士 专业:遗传学 指导教师:李永泉 20040601 摘要抗氧化、提高应激力、增强免疫力、降血脂、抗肿瘤、抗突变等功中性和酸性两种不同性质的多糖,中性多糖和酸性多糖颜色均为为纯白色。气相色谱分析表明:山药中性多糖主要由鼠李糖、木糖、山药(D幻5co陀口凸d加尬JDPcmP),又名白苕、土薯、大薯、薯药,营养丰富,具有很高的药疗价值。《本草纲目》记载:山药性温、味甘平、无毒,健脾胃、益肺肾、涩精止泻;山药还具有抗衰老、效,山药中起到药疗作用的主要成分是山药多糖。本文主要研究山药多糖的提取工艺、分离纯化及多糖的结构分析。提取工艺主要考虑浸提水溶液温度、pH值、料水比和浸提时间对多糖得率的影响,研究最佳的粗多糖浸提工艺参数;首先进行单因素试验,在此基础上采用正交实验进行分析,进而采用中心组合设计进行中试,最后经统计软件matlab编程进行多元线性回归分析得到山药粗多糖较优化提取工艺为:pH值为9.13,料水比为l:5.5,浸提温度85℃左右,沉淀时酒精浓度70%,离心转速1900×g,所提取的粗多糖含纯多糖为20%。分离纯化从山药入手,脱除蛋白质与酒精沉淀后,采用离子交换树脂DEAE一52和SephadexG—loo进行分离,结果得到甘露糖、半乳糖组成,其组成比例为8:16:25:10,酸性多糖主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖组成,其组成比例为7:3:11:19:18。高效液相色谱分析可知中性多糖和酸性多糖的分子。量分别为15598D和21500D;红外分析可知中性多糖和酸性多糖分别含有吡哺糖和Q.糖苷键构型。 professionalpolysacch砸depolysacch撕deindust彤Di。占∞他。between脚terialwo血wouldsoftware.Theoptimalextractingpolysaccharidesupematant,electrifemuselec讲ferousstmcturestatisticalprocedurewaspH9.13,山eratioandwater5.5,underthisconditionsthepuritycnldeis20%.Forre]morVed士’romcolumnchromatographyinpurificationofprecipitatedDEAE一52SephadexcolunmtwoDi()sc()蹭c!扫俄8觏schromatogramshowedpolysacchar主demade1598821500D,inf}aredspectnlm91ycosidicbond,non—electriferouspyraJloseThisestablishbasementapplicationsDiojco坩口扫以加mJefficientindustrialized白以施msD已cm已polysaccharideKeywords:DioscD地口6口搬纪spufificationanalysisoptiInization1:poiysaccharide,theproteinshouldthen.againwithconcentration70%.F01lowing,ion—exchangeG一1OOusedasstepisolation.Atmainpo】ysacchandepolysacchandenon—electriferOusseparatedDecmg,canstnlcturean出ysis.thatelectriferousupof,non—electriferousof,HPLCtestifiedmoIecularweighteIectriferousnon—electriferouspolysaccha矗de’epirrIersresearchstrongforDPcmPdrugalsopointseparationethanolatlastweref0HnwhichGasway浙江大学坝i‘学位论文toex廿act1astoutbearea6Ⅱ 1.3课题立项依据和研究内容子量㈣。分析不完善,可信度不高,因而有必要对提取工艺重新进行优化并进。步放大,本研究将采用单因素设计、正交试验和中心组合试验,结合数理统计方法进行工艺优化,并采用多元线性回归分析建立数学模型,最终获得最佳多糖提取工艺,为工业化放大提供基础。同时进行山药酸性多糖和中性多糖分离纯化,在此基础上测定多糖的分子量、组分和摩尔比,并用现代仪器分析表征多糖的分子量测定常用的方法有层析柱法和高效液相色谱法。赵国华等人以Dextran系列标准品的