保健食品中芦荟甙的测定(高效液相色谱法).doc

保健食品中芦荟甙的测定（高效液相色谱法）
1.范围本方法规定了芦荟胶囊、芦荟片剂、芦荟汁等保健食品种芦荟甙含量的测定方法。本方法适用于芦荟胶囊、芦荟片剂、芦荟汁等保健食品中芦荟甙的测定。本方法的最低检出量10mg。本方法的最佳线性范围：0～100µg/mLy=1124194x+3215：线性关系r＝0.99992.原理用甲醇+水(55+45)作为溶剂，提取试样中的芦荟甙，经高效液相色谱仪C18柱分离，紫外检测器293nm条件下检测，以芦荟甙保留时间定性，峰面积定量。3.试剂（1）甲醇：色谱纯。（2）水：重蒸水。（3）芦荟甙标准品：纯度≥98%。（4）芦荟甙标准溶液的制备：准确称取芦荟甙标准品10mg，加流动相甲醇＋水（55+45）溶解并移入100mL容量瓶中，定容至刻度。4.仪器设备（1）高效液相色谱仪，附紫外检测器。（2）色谱柱C18（以十八烷基键合硅胶填料为填充剂）或具同等性能的色谱柱，150mm×6mm，5μm。（3）超声波清洗器。（4）C18净化富集柱C18预柱子装量0.5g，分配型。（5）离心机3000r/min。5.色谱分离条件（1）流动相：甲醇+水55+45。（2）流速：1mL/min。（3）柱温：40℃。（4）检测波长：293nm。（5）灵敏度：0.016AUFS。（6）进样量：10μL。6.分析步骤（1）试样制备将固体试样粉碎成粉末状，混匀。准确称取上述经处理后的试样1.00g于50mL容量瓶中，加检测用流动相30mL溶解，经超声振提5min加流动相定容50mL，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤，芦荟汁饮料直接经0.45μm滤膜过滤。（2）测定步骤分别精密吸取标准溶液和试样溶液10μL注入高效液相色谱仪，依上述色谱条件，以保留时间定性，用外标法计算试样中芦荟甙的含量。7.计算公式A1×C×VX=—————A2×m式中：X—试样中芦荟甙含量mg/g（mg/mL）；A1—试样中芦荟的峰面积；C—标准溶液浓度，mg/mL；A2—标准液中芦荟甙的峰面积；V—试样定容体积，mL；m—试样质量，g（mL）8.允许误差同一试样两次测定值之差不得超过两次测定平均值的10%。