蜡样芽胞杆菌检测.ppt

蜡样芽胞杆菌检测Bacilluscereusexamination蜡样芽胞杆菌(Bacilluscereus)在国内，于1973年首次报告了南京某托儿所儿童因进食泡饭引起呕吐型蜡样芽胞杆菌食物中毒后，至今除西藏外，每个省、自治区、直辖市已经都有报，有些地区甚至占细菌性食物中毒的首位。
蜡样芽胞杆菌食物中毒特征引起食物中毒的主要食物种类临床表现引起食物中毒的原因－肠毒素新国标编制说明新国标编制说明背景现行GB/T4789.14-2003标准不足处重新修订的意义提高检出率提高检出率表1MYP培养条件选择结果扩大检测范围便于与国际接轨提高方法的适用性和可操作性新标准与GB/T4789.14-2003相比主要修改如下:食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验（修订版）标准修订单位1范围2设备和材料3培养基和试剂第一法蜡样芽胞杆菌平板计数法4检验程序5操作步骤5.1样品处理5.2样品制备5.3样品的稀释5.4样品接种5.5分离、培养分离5.5.2纯培养营养琼脂平板纯化培养6确证实验蜡样芽胞杆菌－革兰氏染色6.2生化鉴定表1蜡样芽胞杆菌的主要生化特征蜡样芽胞杆菌生化特征6.2.1溶血试验蜡样芽胞杆菌－完全溶血环（24h）苏云金芽胞杆菌和蕈状芽胞杆菌呈弱溶血现象，巨大芽胞杆菌不溶血。6.2.2根状生长试验根状生长根状生长6.2.3蛋白质毒素结晶试验观察有无游离芽胞（浅红色）和染成深红色的菱形、正方形或其它形状的蛋白结晶体。如发现游离芽胞形成的不丰富，应将培养物置室温2d～3d再行检查。放置3d～4d以上的苏云金芽胞杆菌培养物有大量的结晶体，但是只有在芽胞裂解通过上述染色方法才能见到。然而，除非见到芽胞，否则培养物应在室温继续放置几天以重新检查毒素晶体。其它芽胞杆菌不产生蛋白质毒素晶体。
苏云金芽胞杆菌－蛋白质毒素结晶苏云金芽胞杆菌－蛋白质毒素结晶蛋白质毒素结晶形态观察6.2.4溶菌酶耐性试验6.6生化分型7结果计算公式（1）：T=
式中：
T——样品中蜡样芽胞杆菌菌落数；
A——某一稀释度蜡样芽胞杆菌典型菌落的总数；
B——鉴定结果为蜡样芽胞杆菌的菌落数；
C——用于蜡样芽胞杆菌鉴定的菌落数；
d——稀释因子。式中：
T——样品中蜡样芽胞杆菌菌落数；
A1——第一稀释度（低稀释倍数）蜡样芽胞杆菌典型菌落的总数；
A2——第二稀释度（高稀释倍数）蜡样芽胞杆菌典型菌落的总数；
B1——第一稀释度（低稀释倍数）鉴定结果为蜡样芽胞杆菌的菌落数；
B2——第二稀释度（高稀释倍数）鉴定结果为蜡样芽胞杆菌的菌落数；
C1——第一稀释度（低稀释倍数）用于蜡样芽胞杆菌鉴定的菌落数；
C2——第二稀释度（高稀释倍数）用于蜡样芽胞杆菌鉴定的菌落数；
1.1——计算系数（如果第二稀释度蜡样芽胞杆菌鉴定结果为0，计算系数采用1）；8结果报告第二法蜡样芽胞杆菌MPN计数法10.1-10.3样品处理、样品制备和样品稀释同平板计数法10.4样品接种10.5培养10.6确证实验11结果报告说明谢谢！