聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配方.doc
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聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配方.doc
溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)5101520253040506%SDS-PAGE水2.65.37.910.613.215.921.226.530%丙烯酰胺溶液12345681010%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5TEMED0.0040.0080.0120.0160.020.0240.0320.048%SDS-PAGE水2.34.66.99.311.513.918.523.230%丙烯酰
聚丙烯酰胺凝胶电泳.doc
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离。聚丙烯酰胺凝胶有以下优点:①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物,没有或很少带有离子的侧基,因而电渗作用比较小,不易和样品相互作用。②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质,在聚合前可调节单体的浓度比,形成不同程度交链结构,其空隙度可在一个较广的范围内变化,可以根据要分离物质分子的大小,选择合适的凝胶成分,使之既有适
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(1)丙烯酰胺结构式(2)亚甲双丙烯酰胺C——Bis占单体与交联剂总量的百分比。C=b/(a+b)×100%当T固定时,Bis浓度在5%时孔径最小。pH8.3Tris-甘氨酸缓冲液思考题
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聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置表1配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)5101520253040508%水2.34.66.99.311.513.918.523.230%丙烯酰胺溶液1.32.745.36.7810.713.31.5mol/LTris(pH8.8)1.32.53.856.37.51012.510%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸铵0.050.10.150.20.250.
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实验目的【SDS-PAGE简介】CH2=CH【SDS-PAGE的特点】PAGE分为连续系统和不连续系统两大类。连续系统:电泳体系中缓冲液PH值及凝胶浓度相同,带点粒子在电场中,主要靠电荷效应和分子筛效应。不连续系统:带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应,还具有浓缩效应、因而其分离条带清晰度及分辨率均较佳。当蛋白质分子量在15,000到200,000Da之间时,蛋白质的相对迁移率与分子量的对数呈线性关系。lgMW=K-bmRMW是蛋白质的分子量,K为常数,b为斜率,mR为电泳相对迁移率。相对迁移率