聚丙烯酰胺凝胶电泳-豆柴文库

聚丙烯酰胺凝胶电泳.ppt

2024-08-13

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聚丙烯酰胺凝胶电泳.doc

聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离。聚丙烯酰胺凝胶有以下优点：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N，N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物，没有或很少带有离子的侧基，因而电渗作用比较小，不易和样品相互作用。②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质，在聚合前可调节单体的浓度比，形成不同程度交链结构，其空隙度可在一个较广的范围内变化，可以根据要分离物质分子的大小，选择合适的凝胶成分，使之既有适

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（1）丙烯酰胺结构式（2）亚甲双丙烯酰胺C——Bis占单体与交联剂总量的百分比。C=b/（a+b）×100%当T固定时，Bis浓度在5%时孔径最小。pH8.3Tris-甘氨酸缓冲液思考题

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聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配置表1配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）5101520253040508%水2.34.66.99.311.513.918.523.230%丙烯酰胺溶液1.32.745.36.7810.713.31.5mol/LTris(pH8.8)1.32.53.856.37.51012.510%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸铵0.050.10.150.20.250.

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聚丙烯酰胺凝胶电泳法1.仪器装置通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极，铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂(1)溶液A取三羟甲基氨基甲烷36.6g，四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml，再加水溶解并稀释至100ml,置棕色瓶内，在冰箱中保存。(2)溶液B取丙烯酰胺30.0g、次甲基双丙烯酰胺0.74g，加水溶解并稀释至100ml,滤过，置棕色瓶内，在冰箱中保存。(3)电极缓冲液(pH8.3)取三羟甲基氨基甲烷6g、甘氨酸28

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