关键词 乙肝病毒,时间分辨免疫荧光技术,实时荧光检测法.doc

时间分辨免疫荧光法检测乙肝病毒抗原抗体与HBV-DNA定量的关系
上海市崇明县传染病医院检验科高丽华
关键词乙肝病毒，时间分辨免疫荧光技术，实时荧光检测法
摘要时间分辨免疫荧光检测与HBV-DNA关系密切,两者联用能更好的满足临床需求。时间分辨免疫荧光分析出现以前大多都是ELISA方法检测血清学标志物来判断,由于本身方法学的限制,ELISA方法只能提供阴阳性判断,并不能提供乙肝病毒标志物的具体含量。另外,ELISA方法的灵敏度也受到方法学上的限制。时间分辨免疫定量检测乙肝血清学标志物不仅能提供每个项目检测的具体含量,更重要的是该方法学本身具有极高的灵敏度.实时荧光法检测HBV-DNA，能直接反映乙肝病毒存在与否，是否在复制，是否具有传染性。［1］所以，研究时间分辨检测乙肝五项与HBV-DNA检测之间的内在联系,更直接、全面的了解HBV在人体内的活动方式,便于更好的服务于临床，做好预防控制工作。
目的探讨时间分辨免疫荧光技术检测乙肝抗原抗体五项指标和HBV-DNA之间的关系
方法将210例血清标本同时对乙肝病毒抗原抗体五项指标定量和HBV-DNA含量分别进行检测,按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行乙肝病毒标志物与HBV-DNA的分析研究。结果乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性（大三阳）组HBV-DNA检出率为96.9%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性（小三阳）组检出率65.2%,HBcAb阳性组检出率47.1%,HBsAb阳性组检出率0%,五项全阴性组检出率0%。
材料与方法
1.标本
本院门诊、住院传染科肝炎病人血清标本210份，患者均是2010年1月至2011年9月我院门诊、住院的肝病患者，均符合1995年（北京）全国传染病寄生虫病学术会议修订的诊断标准。男性156例，女性54例。同时分离进行乙肝病毒抗原抗体定量检测、外送上海艾迪康医学检验中心实时荧光法法检测HBV-DNA。
2.乙肝病毒抗原抗体的定量检测
上海新波公司ANYTEST2000全自动时间分辨荧光免疫分析仪，以及新波HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb时间分辨免疫荧光定量诊断试剂盒。
3.HBV-DNA的定量检测
上海艾迪康医学检验中心实时荧光法检测
4.统计方法
将210份样本按照乙肝五项时间分辨免疫检测的结果分为5组,每一组与相应的HBV-DNA的定量检测结果进行比较分析。
5.结果
乙肝抗原抗体五项时间分辨免疫检测与HBV-DNA定量检测结果的比较。分析见表1所示。
表1乙肝病毒抗原抗体检测与HBV-DNA检测关系分析
组别人数HBV-DNA阳性数检出率（%）HBV-DNA测定值（IU/mL）大三阳656396.91.5*105—2.5*108小三阳895865.25.0*102—5.0*106HbcAb（+）17847.11.0*102—2.0*104HbsAb（+）2000〈1.000*103五项全阴性1900〈1.000*103讨论
乙型肝炎和乙肝病毒携带者在我国广泛流行，人群感染绿非常高，是危害人民健康的最严重传染病之一，影响人民的生活质量。研究乙肝病毒的传染性，危害性，更好地做好预防控制工作，促进人民身体健康，提高生活质量.
时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是一种非同位素免疫分析技术，它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度，本院用的是上海新波公司提供的以稀土元素铕（Eu）为发光标记物的方法。定量检测乙肝病毒标志物.是诊断HBV感染的精确方法,是反映机体在病毒入侵后机体所作出的反应,以及反应的程度和反应的结果，非常适合于乙肝五项的检测分析.HBV-DNA测定能反映患者感染的状态、是否具有传染性和传染性的强弱。由于HBV是DNA病毒,因此HBV-DNA的检测是衡量乙肝传染性的最精确的指标,HBV-DNA阳性即反映有完整的病毒颗粒的复制,是判断患者具有传染性的直接证据。理解乙肝病毒抗原抗体检测与HBV-DNA检测之间的复杂关系对于临床判断与治疗具有重大的指导意义。
由实验结果表1可以看出,大三阳65例HBV-DNA阳性63例,检出率为96.9%,而且HBV-DNA值也比较高,即这些患者体内DNA病毒具有较高的复制水平,是具有传染性的重要标志。表明传统上认为大三阳患者具有较高的传染性的说法较为合理的,小三阳89例HBV-DNA阳性58例,检出率为65.2%。小三阳的HBV-DNA检出率大大低与大三阳，而且数值也较大三阳数值低.但是小三阳病人仍然具有较强的传染性.不论是大三阳或是小三阳,HBsAg阳性情况下,都存在一部分样本中HBV-DNA检测阴性，说明