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微波辅助提取-高效液相色谱法测定蔬果中的Vc含量
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微波辅助提取-高效液相色谱法测定蔬果中的维生素C含量

化学与化学工程学院中心实验室中山大学分析科学研究所，广东510275
*通讯作者，Email:[e-mail]
摘要 本实验用微波辅助提取三种不同水果中的维生素C，采用高效液相色谱法通过标准曲线定量法，借助紫外可见光分析，在265nm的波长下测定维生素C的吸光度，与标准系列比较，以保留时间来定性、峰面积定量。实验测得：在5-100mg/L范围内，维生素C浓度与峰面积具有很好的线性关系（A=32074c/（mg/L）-34595，R2=0.9999）本实验测得每100g橘子、金桔、苹果中的维生素C含量分别为：29.73mg/100g、33.66mg/100g、2.24mg/100g。该操作方法简单方便，灵敏迅速，准确度比较好。
关键词维生素C微波辅助提取高效液相色谱标准曲线

1引言
维生素C，又叫L-抗坏血酸，化学式C6H8O6，是一种水溶性维生素。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收，一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中。正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C，最高储存峰值为3000mg。正常情况下，维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。（摘自http://baike.baidu.com/view/245497.htm）
维生素C的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。另外，坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。富含维生素C的食物有花菜、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素C含量都不少。美国专家认为，每人每天维生素C的最佳用量应为200～300毫克，最低不少于60毫克，半杯（大约一百毫升）新鲜橙汁便可满足这个最低量。而中国营养学会建议的膳食参考摄入量（RNI），成年人为100mg/日，可耐受最高摄入量（UL）为1000mg/日。
维生素C在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。人体内缺乏维生素C时容易导致坏血病。同时，由于维生素C是一种水溶性的抗氧化剂，可参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。维生素C在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中Vc含量在50-300mg/100g。详细含量如下：（摘自http://baike.baidu.com/view/245497.htm）
排名食物质量(g)数量维生素C含量(mg)1樱桃5012粒4502番石榴801个2163红椒801/3个1364黄椒801/3个1205柿子1501个1056青花菜61/4株967草莓1006粒808橘子1301个789芥蓝菜花601/3株7210猕猴桃1001个68维生素C含量的经典测定方法有碘量法[[]武汉大学.分析化学实验室（第三版）北京:高等教育出版社，1997：167-175.
]、荧光法[[]邵晓芬，张韵慧.谱学与光谱分析，1994.14(2)：125-130.
]，随着仪器分析方法的发展，有文献采用邻二氮菲分光光度法间接测定[[]魏玲，吕晓琴，李学琴.邻二氮菲分光光度法间接测定药片中维生素C的含量.昌吉学院学报，2008，2：110-112.
]，也有通过与高锰酸钾反应的分光光度法测定的[[]闰家伟，黄运瑞.分光光度法测定药片中维生素的含量.南阳师范学院学报，2005，4(12)：54-55.
]。之前课程也采用过库仑滴定法对维生素C药片进行维生素C含量，效果颇佳，快速简便。不过对于库仑滴定法利用的是氧化还原原理，所测结果实际上是体系中的还原性物质的维生素C当量，对于复杂体系中存在的其他还原剂，并没有很好的区分作用，例如在测定苹果汁维生素C含量的时候，苹果汁中存在的亚铁离子会使库仑滴定法结果过高。因此，在含有其他还原性物质的复杂体系中，需要采用更精密的方法，本实验采用的是微博提取高效液相色谱法。
样品的预处理是样品分析最为关键的步骤之一，尤其是分析复杂的样品时，样品的预处理是必不可少的。所以，发展快速、高效的样品前处理方法是分析家们一直追求的目标。传统的样品前处理的方法如索氏抽提、超声波萃取等不仅费时，而且溶剂的消耗量大。微波辅助萃取(MicrowaveAssistedExtraction，MAE)具有快速、高效、省溶剂、环境友好等优点。微波技术开始主要是用于无机分析的样品预处理即微波消化，从1986年起微波能开始应用到有机分析中的样品预处理[