高效液相色谱法测定冠心丹参胶囊三七的含量.doc

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高效液相色谱法测定冠心丹参胶囊三七的含量
杨丽(包头中药有限责任公司包头014040)

摘要：冠心丹参胶囊为国家中药保护品种,由丹参、三七、降香油三味组成，具有活血化瘀，理气止痛的药理作用，临床用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷刺痛、心悸气短；冠心病心绞痛见上述证候者。冠心丹参胶囊对冠心病病情轻度及中度者疗效较好，且安全、可靠，无毒副作用。原质量标准只有丹参一项含量测定，为更好地控制产品质量，保证产品的疗效，作者建立了专属性好的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1高效液相色谱法同时测定含量的方法，适用于本制剂的质量控制。
1仪器与试药.
仪器L-2000高效液相色谱系统（日立公司）,电子天平(BP211D)
药品冠心丹参胶囊批号：060516，060622，060625，060626；对照品：三七皂苷R1（110745-200312）、人参皂苷Rg1（110703-200424）和人参皂苷Rb1（110704-200420）、购自中国药品生物制品检定所。其他试剂均为色谱纯、分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件与系统适用性试验
仪器固定相BDSC18柱（250×4.6mm，5µm）
流动相A相：50%乙腈，B相：水；按如下程序梯度洗脱：
时间（min）012110111A45457245B55552855对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.4mg、人参皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.2mg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，研细（过四号筛），取约1g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上保持微沸2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性溶液的制备取不加三七药材的本品,同法制成阴性对照溶液.
作者简介:杨丽女从事中药研发工作大学本科学士学位Tel:0472-4616327Email:nmgbtyangli.@163

分别精密吸取10µl，注入液相色谱仪，测定，阴性无干扰，色谱图见图1。

对照猫画虎
样品
阴性

图1
2.2线性关系考察
配制含三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品各约0.2mg/ml，0.4mg/ml和0.4mg/ml的甲醇溶液，摇匀，精密量取2、8、12、16、20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积对进样量回归得标准曲线，结果见表2～表4。
表2三七皂苷R1HPLC法测定结果
进样量m（µg）0.2480.9921.4881.9842.48峰面积A（µv.s）96320640453436290067834148310610014结果，三七皂苷R1在0.248～2.48µg范围内，峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9998。
表3人参皂苷Rg1HPLC法测定结果
进样量m（µg）0.7322.9284.3925.8567.32峰面积A（µv.s）99730343338276723682902472511529960由表中数据可见，当进样量为0.732～7.32µg范围内时，峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9998。
表4人参皂苷Rb1HPLC法测定结果
进样量m（µg）0.8423.3685.0526.7368.842峰面积A（µv.s）2773371363140212315928921573702300由表中数据可见，当进样量为0.842～8.842µg范围内时，峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9996。
2.3精密度试验
取含量测定项下对照品溶液，连续测定5次，记录色谱图，计算平均值及相对标准偏差，结果见表5。
表5精密度试验结果
进样序号三七皂苷R1人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1118111355960005550302021846872596529155671803188556459277585503492418952745983631550306351889334592056855101846189152859363545494432186995159489345513562RSD（%）1.810.410.492.4稳定性试验
取含量测定项下对照品溶液在8小时内连续进样5次，记录峰面积，结果见表6。
表6稳定性试验结果
时间（h）三七皂苷R1人参皂苷Rg1人参皂苷Rb101282317445218540910902129192344120374157922412901744461713413204061232249448032740670568123752544683784139860126683844549284117594RSD（%）2.080.520