一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基及培养方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113179952A(43)申请公布日2021.07.30(21)申请号202110621574.0(22)申请日2021.06.02(71)申请人吉林省林业科学研究院地址130033吉林省长春市临河街3528号(72)发明人林士杰王梓默朱红波韩姣勾天兵罗也王丽丽张大伟程岩何怀江包广道张忠辉(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图6页(54)发明名称一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基及培养方法(57)摘要本发明公开了一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基，包括：(1)诱导培养基1：在MS培养基的基础上添加2，4‑D，玉米素，KT，脯氨酸，亮氨酸，壳聚糖；和(2)诱导培养基2：在MS培养基的基础上添加2，4‑D，玉米素，KT，硫代硫酸钠，脯氨酸，酪氨酸，壳聚糖，活性炭粉；并且公开了培养方法。本发明培养基及方法可提高愈伤组织形成的速度和质量，进而提高繁育效率。CN113179952ACN113179952A权利要求书1/1页1.一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基，其特征在于，包括：(1)诱导培养基1：在MS培养基的基础上添加2，4‑D1‑2mg/L，玉米素0.3‑1.2mg/L，KT0.1‑0.2mg/L，脯氨酸15‑25mg/L，亮氨酸0.5‑1mg/L，壳聚糖0.2‑0.5g/L；和(2)诱导培养基2：在MS培养基的基础上添加2，4‑D2‑3mg/L，玉米素0.8‑1.8mg/L，KT0.1‑0.2mg/L，硫代硫酸钠0.1‑0.2g/L，脯氨酸30‑40mg/L，酪氨酸20‑30mg/L，壳聚糖0.8‑1.2g/L，活性炭粉0.3‑0.6g/L。2.根据权利要求1所述的一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基，其特征在于，所述活性炭粉粒度为200‑300目。3.一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：1)取2‑3年生紫椴具有腋芽的嫩枝段，消毒，剪至2.5‑3.5cm长，作为外植体；2)将外植体接种于权利要求1所述的诱导培养基1上，20±2℃暗培养3‑5d；3)将步骤2)暗培养后的外植体转移到权利要求1所述的诱导培养基2上，25±2℃继续暗培养10‑14d。4.根据权利要求3所述的一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养方法，其特征在于，步骤1)中的消毒为：流水冲洗2‑5min，使用洗衣粉漂洗2‑3min，再用流水冲洗2‑5min，于质量分数75％的酒精中浸泡30‑50s，转入质量分数0.1％氯化汞中浸泡8‑12min，无菌水洗涤3‑5次。5.根据权利要求3或4所述的一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养方法在紫椴无性繁殖中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，将权利要求3或4获得的愈伤组织转接于分化培养基中，25±2℃培养10‑14d；再转接到生根培养基中，生根后进行移栽。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述分化培养基组成如下：在MS培养基的基础上添加6‑BA1.0‑2.0mg/L，NAA0.5‑1.0mg/L。8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，分化培养基中培养时，光照强度1000‑1500lx，光照时间8‑10h/d。9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述生根培养基组成如下：在MS培养基的基础上添加NAA0.3‑0.5mg/L。10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，生根培养基中培养时，光照强度1500‑2000lx，光照时间10‑12h/d。2CN113179952A说明书1/6页一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基及培养方法技术领域[0001]本发明涉及植物繁殖技术领域，更具体的说是涉及一种提高紫椴愈伤组织诱导率的培养基及培养方法。背景技术[0002]紫椴(Tiliaamurensis)属椴树科(Tiliaceae)椴树属(TiliaL.)，为我国II级珍贵保护树种，主产中国东北、内蒙古东部及黑龙江与乌苏里江流域，向南至朝鲜半岛。[0003]紫椴木材质轻软，纹理致密通直，是市场上优良的胶合板用板及细木工板的重要材料；其生态价值也较高，因树形美观，花朵芳香，是较好的城市和庭院绿化树种。同时，紫椴也是著名的蜜源植物，为我国的特等优质蜜源。紫椴花、根等还可药用。因紫椴具有的工业、食用和药用等多种价值，其需求量逐渐增加。[0004]然而，紫椴种播繁育发芽率低、周期长，扦插繁育较难生根、成活率低，因此，需要研究一种周期短、成活率高的紫椴繁育方法。[0005]有研究人员采用紫椴芽为外植体，不经愈伤组织直接诱导芽分化，可以缩短培养周期，然而采用该方法繁育紫椴会影响后续生根速度、生根率以及移栽成活率，繁育效率较低。愈伤组织的形成对于芽、根的生长具有十分重要的作用，因此，亟待提