一种聚硫化氢荧光探针及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113234039A(43)申请公布日2021.08.10(21)申请号202110320109.3C09K11/06(2006.01)(22)申请日2021.03.25G01N21/64(2006.01)(71)申请人徐州医科大学地址221004江苏省徐州市市辖区铜山路209号徐州医科大学(72)发明人薛运生吴春丽张玲张君瑜刘云萍郑友广(74)专利代理机构南京思拓知识产权代理事务所(普通合伙)32288代理人吕鹏涛王海云(51)Int.Cl.C07D277/66(2006.01)权利要求书2页说明书13页附图10页(54)发明名称一种聚硫化氢荧光探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种聚硫化氢荧光探针及其制备方法和用途，其荧光探针AIE‑PS2具有较大的斯托克斯位移(254nm)，选择性好、灵敏度高、检测限低(9nM)、荧光响应倍数高(75倍)及良好生物相容性的优点。在PBS缓冲液，荧光强度与Na2S4(0‑20μM)浓度之间具有良好的线性关系，说明探针适合于生物体内聚硫化氢的定量检测；探针AIE‑PS2能在细胞水平上对内源性及外源性聚硫化氢进行成像，并进一步应用AIE‑PS2实现了MCF‑7细胞聚硫化氢的荧光成像，是可视化和定量检测聚硫化氢的有效工具。荧光探针AIE‑PS2的结构式如下。CN113234039ACN113234039A权利要求书1/2页1.一种聚硫化氢荧光探针，其探针的结构式如下所示：2.一种权利要求1所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：3.根据权利要求2所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：第一步：在三氟乙酸存在的条件下，化合物TPE‑OH和六亚甲基四胺进行回流反应，制备化合物TPE‑CHO；第二步：在H2O2和HCl存在的条件下，化合物TPE‑CHO和化合物1进行化学反应，制备化合2CN113234039A权利要求书2/2页物TPE‑HBT；第三步：在三乙胺存在的条件下，化合物TPE‑HBT和化合物2进行化学反应，制备荧光探针AIE‑PS2。4.根据权利要求3所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，在第一步中，化合物TPE‑OH和六亚甲基四胺的摩尔比为1:5～15，优选为1:10。5.根据权利要求3所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，在第一步中，化合物TPE‑OH和三氟乙酸的质量体积比为1:50～70g/mL，优选为1:60g/mL。6.根据权利要求3所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，在第二步中，化合物TPE‑CHO和化合物1的摩尔比为1:2.5～4.5，优选为1:3.5。7.根据权利要求3所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，在第三步中，化合物TPE‑HBT和化合物2的摩尔比为1:1.5～4.5，，优选为1:2.5。8.根据权利要求3所述的聚硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，在第三步中，在第三步中，化合物TPE‑HBT和三乙胺的摩尔比为1:20～30，优选为1:24.4。9.权利要求1所述的聚硫化氢荧光探针作为检测聚硫化氢的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述的聚硫化氢荧光探针在细胞水平检测聚硫化氢的应用。3CN113234039A说明书1/13页一种聚硫化氢荧光探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于化学及分析检测领域，具体涉及一种基于聚集诱导发光和分子内质子转移双重机理的聚硫化氢荧光探针及其制备方法和用途。背景技术[0002]硫化氢(Hydrogensulfide，H2S)是一种重要的气体信号分子，生理浓度的H2S对细胞具有保护作用，参与神经调节、血管紧张度调节、氧化应激、炎症反应、线粒体供能和纤维化等过程。聚硫化氢(hydrogenpolysulfides，H2Sn，n≥2)是H2S的氧化产物，属于硫烷硫类化合物(sulfanesulfur)。在生命系统中H2S与H2Sn共存，共同来调节细胞内的氧化还原稳态，二者在生物活性和信号通路方面存在着串联关系(cross‑talk)。H2Sn中的硫氧化价态为零，容易与蛋白质的半胱氨酸残基反应形成蛋白质过硫化物，该过程被称为S‑巯基化修饰(也称为S‑过硫醇化或S‑过硫化)，参与多种生物学功能。最近的研究表明，在H2S的相关生理过程中，实际的信号转导分子可能是(至少部分是)H2Sn。聚硫化氢在机体中发挥重要的生理功能，调节受体、酶及离子通道的活动，参与氧化还原信号传导，具有细胞保护、抗炎、抗癌、和抗氧化等作用。[0003]荧光探针具有快捷、灵敏、，更适合无创可视化检测的优势，在生物传感、光学材料及生物检测和识别等领域得到了广泛的应用。然而，有机荧光染料