一种用于检测多硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113698379A(43)申请公布日2021.11.26(21)申请号202111220134.0(22)申请日2021.10.20(71)申请人中国科学院烟台海岸带研究所地址264003山东省烟台市莱山区春晖路17号(72)发明人陈令新张良伟张霞杨阳张丽(74)专利代理机构北京中济纬天专利代理有限公司11429代理人潘剑敏(51)Int.Cl.C07D311/92(2006.01)C09K11/06(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种用于检测多硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种用于检测多硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用，其中，该荧光探针是基于香豆素衍生物的有机小分子化合物，结构式如下所示：该荧光探针能够高选择性和高灵敏性的响应H2Sn，在H2Sn存在下，荧光光谱出现明显新的发射峰，可用于溶液和细胞中H2Sn的定性定量检测，并可大大降低外部检测条件的干扰，具有较快的检测速度和较高的检测精度。CN113698379ACN113698379A权利要求书1/1页1.一种用于检测多硫化氢的荧光探针，其特征在于，所述荧光探针是基于香豆素衍生物的有机小分子化合物，结构式如式I所示：式I。2.权利要求1所述的用于检测多硫化氢的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将香豆素衍生物荧光团充分溶于乙腈中，然后加入2,4‑二硝基氯苯，溶解后，向混合溶液中逐滴加入N,N‑二异丙基乙胺，油浴80℃下加热冷凝回流2h；（2）薄层色谱法监测反应完成后，将混合溶液冷却至室温，抽滤，得到白色固体，即所述的荧光探针。3.根据权利要求2所述的用于检测多硫化氢的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述香豆素衍生物荧光团、2,4‑二硝基氯苯和N,N‑二异丙基乙胺的摩尔比为1:2:1.5。4.权利要求1所述的用于检测多硫化氢的荧光探针的应用，其特征在于，用于检测溶液和细胞中的多硫化氢。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，将荧光探针溶于二甲基亚砜中，配制成10mM储备液，保存于4℃药品阴凉柜中，检测时，将荧光探针储备液用二甲基亚砜稀释，并使其工作浓度为10μM。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，检测在pH=7.4下进行，用HEPES缓冲溶液与DMF组成的混合溶液作为反应体系，HEPES缓冲溶液与DMF的体积比为9:1。2CN113698379A说明书1/5页一种用于检测多硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及一种荧光探针及其制备方法和应用，具体涉及一种用于检测多硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用，属于化学技术领域。背景技术[0002]作为硫化氢（H2S）的直接氧化形式，多硫化氢（H2Sn，n>1）具有亲核性、抗氧化性、细胞保护性以及氧化还原性。多硫化氢能参与细胞内一系列的氧化还原调节，与细胞的生理病理学功能密切相关。除此之外，越来越多由硫化氢参与的生理性活动其实际上是由多硫化氢介导的。对内源性的多硫化氢来说，它能由内源性的活性氧物种（ROS）氧化硫化氢内源性产生。因此，合理的推断，硫化氢只是多硫化氢生理性活动中所释放的标志物，而多硫化氢可能是实际的信号分子。详尽的了解多硫化氢在正常和疾病状态下的产生、分布和生理功能，对阐明细胞信号转导机制有着重要的意义。[0003]由于生物体内的环境具有多样性和复杂性，所以开发一种具有高选择性和灵敏性的分析方法来检测多硫化氢有很大研究价值与意义。荧光生物成像技术支撑的可视化研究，在生命分析领域中扮演着非常重要的角色。利用荧光探针的高灵敏度、可控开关操作、选择性好、高生物兼容性等优点，易实现实时原位检测和观察。[0004]基于2,4‑二硝基苯响应基团的用以检测硫化氢的一类荧光探针，检测硫化氢主要是利用硫化氢的亲核性打开2,4‑二硝基苯基团与荧光团之间连接的醚键，从而实现荧光基团的释放，进而达到荧光改变的效果。而在中性环境下，多硫化氢具有比硫化氢更强的亲核性，也就意味着具有更强的进攻能力。但是这些荧光探针在选择性研究上并没有将多硫化氢考虑在内，更没有测试探针对多硫化氢有响应。因此，探究这一类响应基团对多硫化氢的选择性具有重要的意义。同时，由于目前可应用于检测多硫化氢的荧光探针的发展主要集中在荧光团的开发，而对多硫化氢的特异性响应基团的开发较少，因此，开发一种新的多硫化氢响应基团具有重要的研究价值和发展前景。发明内容[0005]为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种用于检测多硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用。[0006]为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：一种用于检测多硫化氢的荧光探针，其特征在于，前