一种灌注保存液.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113812397A(43)申请公布日2021.12.21(21)申请号202111157106.9(22)申请日2021.09.30(71)申请人佛山市第一人民医院（中山大学附属佛山医院）地址528000广东省佛山市禅城区岭南大道北81号(72)发明人何惠仪加文·杰尔巴里·富勒陈焕伟(74)专利代理机构广州嘉权专利商标事务所有限公司44205代理人甘永恒(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图3页(54)发明名称一种灌注保存液(57)摘要本发明公开了一种灌注保存液，包括以下浓度的组分：柠檬酸钾8.5‑10g/L；柠檬酸钠8‑9g/L；甘露醇30‑35g/L；硫酸镁8‑12g/L；HIF‑PH抑制剂25‑1000μM，所述灌注保存液用于在保存温度发生变化条件下细胞、组织或器官的动态保存。该灌注保存液能用于器官或细胞的动态保存应用，保证器官或细胞的活性，减轻移植细胞、组织或器官的冷缺血再灌注损伤,从而在保存温度变化的环境中提高细胞、组织或器官存活率，提高移植效果质量。CN113812397ACN113812397A权利要求书1/1页1.一种灌注保存液，其特征在于：包括以下浓度的组分：柠檬酸钾8.5‑10g/L；柠檬酸钠8‑9g/L；甘露醇30‑35g/L；硫酸镁8‑12g/L；HIF‑PH抑制剂25‑1000μM；所述灌注保存液用于在保存温度发生变化条件下细胞、组织或器官的动态保存。2.根据权利要求1所述的一种灌注保存液，其特征在于：所述HIF‑PH抑制剂为钴盐类化合物。3.根据权利要求2所述的一种灌注保存液，其特征在于：所述HIF‑PH抑制剂为水合氯化钴，且所述水合氯化钴在所述灌注保存液中的浓度为25‑200μM。4.根据权利要求1所述的一种灌注保存液，其特征在于：所述HIF‑PH抑制剂为二甲基草酰甘氨酸，且所述二甲基草酰甘氨酸在所述灌注保存液中的浓度为125‑1000μM。5.根据权利要求1所述的一种灌注保存液，其特征在于：所述灌注保存液的pH为7.0‑8.0。6.根据权利要求1所述的一种灌注保存液，其特征在于：所述灌注保存液的渗透压为450‑500mOsmol/kg。7.权利要求1‑6任一项所述的灌注保存液在细胞、组织或器官移植中的应用，所述灌注保存液能减缓细胞、组织或器官在保存过程中由于保存温度变化产生的应激损伤。8.一种细胞的保存方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将细胞以一定的接种密度接种到细胞培养板中，并在常氧培养箱中培养20‑30小时；(2)将培养后的细胞分别在权利要求1‑6中任一项所述的灌注保存液中冷藏20‑30小时，冷藏温度为3‑5℃；(3)将细胞放回到新鲜培养基中，缓慢升温至35‑40℃，并培养5‑8天，进行细胞存活，复苏和恢复。9.根据权利要求8所述的一种细胞的保存方法，其特征在于：步骤(1)中细胞的接种密度为7000‑9000细胞/平方厘米。2CN113812397A说明书1/4页一种灌注保存液技术领域[0001]本发明属于器官移植技术领域，特别涉及一种灌注保存液。背景技术[0002]目前在国内除自行研制的HCA保存液之外，其他器官保存液例如UniversityofWisconsin(UW)价格不但昂贵,基本都依赖于进口。因此，尽早研制出我们自己的对多器官或者单个器官保存效果优良且价格低廉的灌注保存液迫在眉睫。另外,目前器官的灌注保存液的缺点是仅能对器官或细胞进行静态冷藏应用，器官或细胞储存时间有限，且当保存温度升高时，器官或细胞的活力和增殖力急速降低，极易出现器官损伤或细胞凋亡的情况，从而出现不利于移植的情况。发明内容[0003]本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种灌注保存液，该灌注保存液能用于器官或细胞的动态保存应用，保证器官或细胞的活性，减轻移植细胞、组织或器官的冷缺血再灌注损伤,从而在保存温度变化的环境中提高细胞、组织或器官存活率，提高移植效果质量。[0004]本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：[0005]一种灌注保存液，包括以下浓度的组分：柠檬酸钾8.5‑10g/L；柠檬酸钠8‑9g/L；甘露醇30‑35g/L；硫酸镁8‑12g/L；HIF‑PH抑制剂25‑1000μM；所述灌注保存液用于在保存温度发生变化条件下细胞、组织或器官的动态保存。[0006]优选的，所述HIF‑PH抑制剂为钴盐类化合物。[0007]优选的，所述HIF‑PH抑制剂为水合氯化钴，且所述水合氯化钴在所述灌注保存液中的浓度为25‑200μM。[0008]进一步优选的，所述HIF‑PH抑制剂为水合氯化钴，且所述水合氯化钴在所述灌注保存液中的浓度为100μM或