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《如何构建质粒克隆》.ppt
2024-08-14
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2024-08-14
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如何构建质粒克隆(1).ppt
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2024-08-05
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质粒克隆等实验.doc
1.PCR反应取1µl逆转录产物为模板，在25µlPCR扩增反应体系中先将模板于97℃变性5min（热启动过程），加入TaqDNA聚合酶，在PE2400PCR热循环仪中循环35次。PCR反应体系：ddH2O：15.5µl10缓冲液：2.5µlMgcl2:1.5µldNTPs(2.5mmol/L)：2.0µlcDNA模板：1.0µl上游引物(10pmol/µl)：1.0µl下游引物(10pmol/µl)：1.0µlTaqDNA聚合酶（5u/µl）：0.5µl循环参数：94℃，30s；X℃，30s；72℃，
2024-08-16
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质粒克隆等实验.pdf
1.PCR反应取1µl逆转录产物为模板，在25µlPCR扩增反应体系中先将模板于97℃变性5min（热启动过程），加入TaqDNA聚合酶，在PE2400PCR热循环仪中循环35次。PCR反应体系：ddHO：15.5µl210缓冲液：2.5µlMgcl:1.5µl2dNTPs(2.5mmol/L)：2.0µlcDNA模板：1.0µl上游引物(10pmol/µl)：1.0µl下游引物(10pmol/µl)：1.0µlTaqDNA聚合酶（5u/µl）：0.5µl循环参数：94℃，30s；X℃，30s；72℃，
2024-06-19
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一种用于无缝克隆的质粒及其构建方法与应用.pdf
本发明公开了一种用于无缝克隆的质粒及其构建方法与应用。本发明质粒是以pACCRT‑EIB质粒为模板，通过分别设计引物进行扩增得到4个片段，再将4个片段按转录方向依次连接起来得到。本发明的克隆质粒不仅有抗性基因作为筛选基因，还插入了一段还插入了一段CrtE、CrtI、CrtB序列，该序列的存在可以使大肠杆菌呈现红色，因此在使用该发明进行克隆时，克隆成功菌落则为白色，否则呈现红色，可以通过直观的颜色变化有效减轻阳性菌的筛选工作量。
2023-06-03
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