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植物组织中dna的提取及鉴定实验报告

实验目的：

1、了解植物组织中DNA的提取和鉴定方法；

2、学习DNA凝胶电泳和显色的实验操作；

3、掌握实验数据处理和分析方法。

实验原理：

DNA提取：DNA提取是从生物体组织中分离出DNA分子的
过程。植物组织的DNA提取主要采用CTAB法，其基本步骤
如下：

1.将植物样本冷冻在液氮或在-80℃的冰箱中保存。

2.取出植物组织并磨碎，用盐水淋洗去表面的杂质。

3.加入抑制物质，如PVP（聚乙烯吡咯烷酮）和β-多聚糖。

4.加入CTAB提取缓冲液，破解细胞壁并溶解细胞质。

5.加入丙酮使DNA沉淀。

6.安排离心管，离心沉淀。

7.用乙醇洗涤、重悬DNA。

DNA鉴定：鉴定常用的方法包括电泳、吸光度法、荧光PCR
等。本实验采用琼脂糖凝胶电泳法，基本步骤如下：

1.制备琼脂糖凝胶。

2.调制电泳缓冲液。

3.加载DNA样品。

4.进行电泳。

5.显色染色。

实验材料：

1、植物样本（如玉米叶片、小麦胚芽等）

2、CTAB提取缓冲液（含CTAB，EDTA，NaCl，Tris-HCl等）

3、琼脂糖

4、电泳缓冲液

5、DNA标准品

6、DNA分子量标记

实验步骤：

1.取少量植物样本，将其用盐水淋洗，除去表面污垢和杂质。

2.装入离心管并加入CTAB提取缓冲液，放在60℃水浴中孵
育20分钟。

3.加入冷丙酮沉淀DNA，离心5分钟。

4.加入70%乙醇，洗涤DNA，离心5分钟。

5.将DNA重悬于1xTE缓冲液中，放在冰箱中储存。

6.取一定体积的DNA样品，加入适量电泳缓冲液稀释。

7.制备含DNA分子量标记的DNA样品，混合后加入琼脂糖
凝胶槽中。

8.加载DNA样品，与分子量标记一起进行琼脂糖凝胶电泳。

9.进行电泳10-20分钟，直至DNA分子离子迁移完毕。

10.取出琼脂糖凝胶，进行染色与分析。

实验结果：

通过电泳可见DNA样品的带状图谱，观察带状图谱的大小、
稠密程度、条带间距和条带的清晰度等特征，进而分析DNA
样品的品质和纯度。同时，还可以使用分子量标记进行条带分
析，推断DNA分子大小。

实验结论：

通过实验，我们成功地提取出植物组织中的DNA，并在琼脂
糖凝胶电泳中对其进行了鉴定。通过电泳图谱的分析，我们可
以得出植物组织DNA的品质和纯度情况，并进一步推断
DNA分子的大小。此实验成功说明了DNA提取和鉴定的基本
步骤和操作方法，有助于我们更深入地了解DNA分子的性质
和在生命科学领域的应用。