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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113755559A(43)申请公布日2021.12.07(21)申请号202110945613.2C12M1/02(2006.01)(22)申请日2021.08.17C12M1/00(2006.01)(71)申请人中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所地址215123江苏省苏州市苏州工业园区独墅湖高教区若水路398号(72)发明人王丹丹甘明哲崔金辉(74)专利代理机构南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)32256代理人王锋(51)Int.Cl.C12Q1/6844(2018.01)C12Q1/6806(2018.01)C12N15/10(2006.01)C12M1/34(2006.01)权利要求书3页说明书10页序列表1页附图5页(54)发明名称核酸检测方法、核酸检测系统及试剂盒(57)摘要本发明揭示了一种核酸检测方法、核酸检测系统及试剂盒。所述核酸检测方法包括:提供用于核酸检测的预处理芯片,其包括样品上样垫、核酸结合卡和吸水垫等;将待检测的液态样品施加到所述样品上样垫上,通过吸水垫的毛细作用将液态样品所含的目标核酸富集到核酸结合卡上,再对所述核酸结合卡进行干燥处理;将干燥后的所述核酸结合卡置入核酸扩增模块,并加入核酸扩增组件形成核酸扩增反应体系,再进行核酸扩增反应,且以荧光检测模块进行检测。本发明无需使用大型或精密的仪器,就可以方便、快速、准确、低成本的实现对目标核酸的检测,检测灵敏度高,检测稳定性好,能实现随时随地对各类核酸样品的检测,很好地满足户外等多种场景的检测需求。CN113755559ACN113755559A权利要求书1/3页1.一种核酸检测方法,其特征在于,包括:提供用于核酸检测的预处理芯片,其包括沿设定方向依次连接的样品上样垫(11021)、核酸结合卡(11022)和吸水垫(11023),其中所述核酸结合卡(11022)能够捕捉目标核酸;将待检测的液态样品施加到所述样品上样垫(11021)上,通过吸水垫(11023)的毛细作用将液态样品所含的目标核酸富集到核酸结合卡(11022)上,再对所述核酸结合卡(11022)进行干燥处理;将干燥后的所述核酸结合卡(11022)置入核酸扩增模块,并加入核酸扩增组件形成核酸扩增反应体系,再进行核酸扩增反应,且以荧光检测模块进行检测。2.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于:0<所述样品上样垫(11021)与吸水垫(11023)之间的距离≤核酸结合卡于设定方向上的长度。3.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于包括:采用加热干燥或自然干燥方式对核酸结合卡(11022)进行所述的干燥处理;优选的,所述的干燥处理包括:在所述核酸结合卡(11022)上施加易挥发有机溶剂,之后使所述核酸结合卡(11022)自然干燥;更优选的,所述易挥发有机溶剂包括乙醇。4.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于,包括:采用核酸扩增芯片作为所述核酸扩增模块;将干燥后的所述核酸结合卡与核酸扩增组件加入所述核酸扩增芯片,以形成所述核酸扩增反应体系,之后将所述核酸扩增芯片置入便携式荧光检测仪进行所述的核酸扩增反应。5.根据权利要求4所述的核酸检测方法,其特征在于,所述便携式荧光检测仪包括:加热元件,用于将所述核酸扩增反应体系加热至足以引发所述核酸扩增反应的温度;光源,用于提供激发光照射所述核酸扩增反应体系以产生荧光信号;优选的,所述激发光为线性激光,且所述线性激光所照射的范围为所述核酸扩增反应体系的上清液部分。6.根据权利要求1或4所述的核酸检测方法,其特征在于,所述核酸扩增芯片包括:第一扩增室,用于容纳所述核酸扩增反应体系;第二扩增室和/或第三扩增室,其中第二扩增室用于容纳用于作为空白组的液体样品,第三扩增室用于容纳作为内标的液体样品。7.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于,包括:将所述核酸扩增组件的各组分分别预存于一毛细管管腔的多个不同储存区段内,多个所述的储存区段沿所述毛细管的长度方向分布;向所述毛细管管腔内施加压力,从而将所述核酸扩增组件的各组分注入所述核酸扩增模块并混合,且与所述核酸结合卡配合形成所述核酸扩增反应体系。8.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于:所述核酸扩增反应体系包括重组酶介导的核酸等温扩增反应体系或滚环扩增反应体系,优选为重组酶介导的核酸等温扩增反应体系。9.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于,具体包括:在所述核酸扩增反应体系内加入顺磁性或铁磁性搅拌子,用以在磁场作用下持续或间歇搅动所述核酸扩增反应体系。2CN113755559A权利要求书2/3页10.根据权利要求1所述的核酸检测方法,其特征在于,具体包括:采用便携式智能终端作为所述的荧光检测模块