双分子标记在灵芝菌株选育的应用、选育、种植方法和灵芝菌株.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114317802A(43)申请公布日2022.04.12(21)申请号202111637410.3A01G18/40(2018.01)(22)申请日2021.12.30C12R1/645(2006.01)(71)申请人重庆市中药研究院地址400065重庆市南岸区南山路34号申请人重庆市渝本草生物科技有限公司(72)发明人贺宗毅陈仕江王伯初郝石磊李卿张德利邢康康游华建罗昌树谭发银(74)专利代理机构重庆知竞合专利代理事务所(普通合伙)50291代理人成艳(51)Int.Cl.C12Q1/6895(2018.01)C12N1/14(2006.01)A01G18/00(2018.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称双分子标记在灵芝菌株选育的应用、选育、种植方法和灵芝菌株(57)摘要本发明涉及药用菌育种领域，公开了一种双分子标记在灵芝菌株选育的应用、选育、种植方法和灵芝菌株，包括双分子标记、MIP和cla4基因型在灵芝杂交菌株的选育和种植方法的应用、选育和种植方法以及所获得的灵芝子实体和孢子粉。本发明的目的是解决现有灵芝选育中担孢子之间自由配对的结合率低、选育周期长的问题，具有提供一种缩短选育周期的利用MIP和cla4基因型在灵芝菌株选育的应用、灵芝杂交菌株的获得和种植方法。CN114317802ACN114317802A权利要求书1/1页1.双分子标记在灵芝杂交菌株的选育和种植方法的应用。2.MIP和cla4基因型在提高子实体产量的灵芝杂交菌株选育和种植方法上的应用。3.MIP和cla4基因型在提高孢子粉产量的灵芝杂交菌株选育和种植方法上的应用。4.MIP和cla4基因型在选育和种植抗绿色木霉病灵芝杂交菌株方法上的应用。5.一种灵芝杂交菌株的选育方法，其特征在于：包括以下步骤，1）获得单个担孢子；2）获得单孢子群落；3）鉴定单孢子群落中由单孢子萌发的菌丝基因型，鉴定出仅含有交配型座位A中的基因型和仅含有交配型座位B中的基因型的单孢子群落，并单独培养，分别得到交配型座位A基因型群落和交配型座位B基因型群落；4）选取交配型座位A基因型群落和交配型座位B基因型群落的菌株进行两两配对培养；5）培养后，挑取菌丝观察，发现锁状联合，获得杂交菌株。6.根据权利要求5所述的一种灵芝杂交菌株的选育方法，其特征在于：所述步骤1）中的单个担孢子获得的方式为稀释分离法；所述步骤3）和4）中交配型座位A基因型为MIP基因型，交配型座位B基因型为cla4基因型，鉴定菌丝基因型的方法为PCR、测序、HRM、核酸杂交中的一种或多种；所述在步骤5）中，挑取菌丝观察时，是在MIP基因型群落和cla4基因型群落两两配对培养的菌丝接合处挑取；还包括步骤6），将步骤5）中获得的杂交菌株，再进行基因型鉴别，选取均含有MIP基因型和cla4基因型的杂交菌株，获得优良型杂交菌株。7.利用如权利要求1～4任意一项所述的MIP和cla4基因型在灵芝杂交菌株选育和种植方法上应用所获得的灵芝杂交菌株。8.利用如权利要求5或6所述的选育方法所获得的灵芝杂交菌株。9.利用如权利要求5或6所述的选育方法所获得的灵芝杂交菌株的灵芝种植方法。10.利用如权利要求9的灵芝种植方法所获得的灵芝子实体、孢子粉。2CN114317802A说明书1/6页双分子标记在灵芝菌株选育的应用、选育、种植方法和灵芝菌株技术领域[0001]本发明涉及药用菌育种领域，具体涉及了一种双分子标记在灵芝菌株选育的应用、获得、种植方法和灵芝菌株。背景技术[0002]灵芝在广义上是灵芝属（Ganoderma）的总称，在生物分类学上隶属于真菌界（KingdomFungi），担子菌门（Basidiomycota），担子菌纲（Basidiomycetes），灵芝目（Ganodermatales），灵芝科（Ganodermataceae），其使用历史可追溯至距今6800年前的新石器时代（河姆渡文化时期），是我国传统著名中药材。中华传统医学长期以来视其为滋补强壮、固本扶正的珍品。古今药理与临床研究均证明灵芝具有益气血、安心神、健脾胃等功效。现代药理学与临床实践亦进一步证明了灵芝的药理作用，并证实灵芝多糖、灵芝三萜是灵芝发挥药理作用的重要成分。[0003]近年来，在国家政策红利和国家积极推行健康中国战略背景下，尤其在中医“治未病”健康理念的推广下，灵芝大健康产业发展迅猛。至新冠肺炎疫情暴发以来，人们愈发认识到健康的重要性，深刻意识到了人体免疫力的重要性，消费者希望通过服用适合自身需求的保健食品，作为提高免疫力最方便、最直接的手段，引导了健康消费需求的充分释放，以中药材和药食两用物质为原料生产的保健食品市场销售量强势增长。据药智大数据统计分析，2020年全