一种N-乙酰-L-半胱氨酸的检测方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115754043A(43)申请公布日2023.03.07(21)申请号202211385761.4(22)申请日2022.11.07(71)申请人天津金耀集团湖北天药药业股份有限公司地址441000湖北省襄阳市汉江北路99号(72)发明人曹琦(74)专利代理机构襄阳蒲公英知识产权代理事务所(普通合伙)42306专利代理师严明慧(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/86(2006.01)G01N30/88(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图3页(54)发明名称一种N-乙酰-L-半胱氨酸的检测方法(57)摘要本发明一种N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，包括如下步骤：S1：精密量取空白溶液2ml、对照品溶液2ml和供试品溶液2ml，分别置于50ml碘量瓶中；S2：上述碘量瓶中各加45％(w/w)的氢氧化钠溶液3ml，置70℃水浴上加热1h，再各加甲酸2ml轻轻摇晃放热；S3：然后再各加30％过氧化氢溶液1ml，放置30分钟，精取上述溶液2ml置25ml容量瓶中，加水稀释至刻度；S4：分别取10μl注入氨基酸分析仪进行测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。本发明检测方法高效、精准，快速，目前已彻底解决17AA中N‑乙酰‑L‑半胱氨酸峰拖尾、峰分叉、峰面积异常的问题。CN115754043ACN115754043A权利要求书1/1页1.一种N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：精密量取空白溶液2ml、对照品溶液2ml和供试品溶液2ml，分别置于50ml碘量瓶中；S2：上述碘量瓶中各加45％(w/w)的氢氧化钠溶液3ml，置70℃水浴上加热1h，再各加甲酸2ml轻轻摇晃放热；S3：然后再各加30％过氧化氢溶液1ml，放置30分钟，精取上述溶液2ml置25ml容量瓶中，加水稀释至刻度；S4：分别取10μl注入氨基酸分析仪进行测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。2.根据权利要求1所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述空白溶液为纯水。3.根据权利要求1所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述对照品溶液的制备方法为：精密称取N‑乙酰‑L‑半胱氨酸对照品25mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，平行制备两份对照品溶液，其中一份作为对照品溶液，一份作为核对对照品溶液。4.根据权利要求1所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述供试品溶液为直接取用复方氨基酸注射液(17AA)溶液。5.根据权利要求1所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述氨基酸分析仪的色谱条件为分离柱温度57℃，反应柱温度135℃。6.根据权利要求5所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述色谱条件还包括流动相B1、B2、B3、B4、B5、B6和反应相R1、R2、R3的配制。7.根据权利要求6所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述流动相至少采用蒸馏水、柠檬酸钠、氢氧化钠、氯化钠、柠檬酸、乙醇和纯水中的一种制得。8.根据权利要求1所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：还包括系统适应性试验：精密量取对照品溶液10μl注入氨基酸分析仪，记录色谱图，N‑乙酰‑L‑半胱氨酸与相邻溶剂峰的分离度应不低于1.2。9.根据权利要求8所述的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法，其特征在于：所述系统适应性试验还包括：精密量取空白溶液、两份对照品溶液、两份供试品溶液，每份10μl，注入氨基酸分析仪，记录色谱图，其中，空白溶液进二针、对照品溶液进五针、核对对照品一针，每份供试品溶液进一针，先计算核对对照品的回收率和对照品的RSD值，若对照品溶液的五针RSD值不大于2.0％，且核对对照回收率在98.0％～102.0％，则所测结果有效；若有一项不符合要求，则表明色谱系统不稳定，在进行相应影响因素排查处理后需重新测定。2CN115754043A说明书1/3页一种N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法技术领域[0001]本发明涉及药物分析检测技术领域，尤其涉及一种N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的检测方法。背景技术[0002]N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的常规检测方法在《西药部颁》第6册，采用照高效液相色谱法测定，其中，(1)色谱条件与系统适应性试验：用阳离子交换树脂为填充剂；以水(用0.05mol/L的硫酸溶液调节pH值约为3.0)为流动相；检测波长为210nm。N‑乙酰‑L‑半胱氨酸分离度应符合要求，拖尾因子应在0.90～1.10之间。(2)对照品溶液的制备：取N‑乙酰‑L‑半胱氨酸对照品约20mg，精密称定，置100ml量