一种牛膝皂苷的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102648925A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102648925A(43)申请公布日2012.08.29(21)申请号201110045308.4(22)申请日2011.02.25(71)申请人苏州宝泽堂医药科技有限公司地址215125江苏省苏州市工业园区星湖街218号纳米科技园A2栋101室(72)发明人李法庆刘东锋(51)Int.Cl.A61K36/21(2006.01)A61P9/00(2006.01)A61P15/04(2006.01)A61P29/00(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书33页页(54)发明名称一种牛膝皂苷的制备方法(57)摘要本发明涉及一种牛膝皂苷的制备方法，包括以下步骤：将牛膝干燥药材粉碎，加入适量蒸馏水和0.3-0.8％生物酶自然酶解，得酶解原料，微波萃取，离心得萃取液，大孔树脂柱吸附，D-280树脂脱色，下柱液浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，放置结晶，重结晶，滤出结晶干燥即得牛膝皂苷。本发明的方法具有操作简单、得率高、纯度高的优点。CN10264895ACN102648925A权利要求书1/1页1.一种牛膝皂苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)酶解：将牛膝药材粉碎，加入适量蒸馏水和0.3-0.8％生物酶自然酶解，得酶解原料；(2)微波萃取：将上述酶解原料置于微波提取设备中，加入3-7倍蒸馏水，萃取1-2次，离心得到萃取液；(3)分离：上述萃取液通过大孔吸附树脂柱吸附，以蒸馏水洗脱杂质，再用5-55％醇溶液洗脱，收集40-55％醇溶液洗脱液；(4)脱色：将上述醇溶液洗脱液通过D-280柱，收集下柱液；(4)重结晶：将上述下柱液浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，趁热过滤，放置结晶，重结晶，滤出结晶，真空干燥即得高纯度牛膝皂苷。2.根据权利要求1所述的一种牛膝皂苷的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中微波萃取功率400-700W。3.根据权利要求1所述的一种牛膝皂苷的制备方法，其特征在于步骤(3)所述大孔树脂型号可选HPD-400、X-5、NKA-9和D-4020中的一种，洗脱用醇溶液为乙醇溶液。2CN102648925A说明书1/3页一种牛膝皂苷的制备方法技术领域：[0001]本发明涉及一种从植物体内提取制备皂苷的方法，具体涉及一种牛膝皂苷的制备方法。背景技术：[0002]牛膝(RadixAchyranthisBidentatae)为苋科植物牛膝的根。分布于非洲、俄罗斯、越南、印度、马来西亚、菲律宾、朝鲜以及中国除东北外全国各地等地。具有补肝肾、强筋骨、活血通经、引火下行、利尿通淋的功效，用于腰膝酸痛、下肢痿软、血滞经闭、痛经、产后血瘀腹痛、癥瘕、胞衣不下、热淋、血淋、跌打损伤、痈肿恶疮、咽喉肿痛等症。根含皂苷，主要为三萜类皂苷。王丽景对牛膝提取及其药理作用的研究表明牛膝皂苷有兴奋子宫、抗生育作用，抗肿瘤作用，心血管药理作用以及抗炎、镇痛作用等。[0003]目前，牛膝皂苷的提取纯化方法很少，传统多采用醇提正丁醇萃取法，该方法具有成本高、有机溶剂毒性残留的缺点。如王晓娟等采用乙醇提取，硅胶低压柱分离法曾获得两个新皂苷单体：牛膝皂苷Ⅰ(3-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1-3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸]-齐墩果酸-28-O-(β-D-吡喃葡萄糖)，牛膝皂苷Ⅱ(3-O-(β-D-吡喃葡萄糖醛酸)-齐墩果酸-28-O-(β-D-吡喃葡萄糖)。郭胜民等将正丁醇萃取所得怀牛膝总皂苷，经硅胶柱层析，用醋酸乙酯梯度洗脱，得到怀牛膝皂苷A。再如中国专利(申请号为201010191221.3)“牛膝皂苷的提纯方法”，该专利公开的方法是以牛膝为原料，选用大孔吸附树脂富集纯化，用D101大孔吸附树脂柱吸附的流程式方法对牛膝的有效成分进行分离提取，得到牛膝皂苷。发明内容：[0004]针对上述现有技术，本发明所要解决的问题是提供一种牛膝皂苷的制备方法。[0005]本发明是通过以下技术方案实现的：[0006]一种牛膝皂苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：[0007](1)酶解：将牛膝药材粉碎，加入适量蒸馏水和0.3-0.8％生物酶自然酶解，得酶解原料；[0008](2)微波萃取：将上述酶解原料置于微波提取没备中，加入3-7倍蒸馏水，萃取1-2次，离心得到提取液；[0009](3)分离：上述提取液通过大孔吸附树脂柱吸附，以蒸馏水洗脱杂质，再用5-55％醇溶液洗脱，收集40-55％醇溶液洗脱液；[0010](4)脱色：将上述醇溶液洗脱液通过D-280柱，收集下柱液；[0011](4)重结晶：将上述下柱液浓缩成浸膏，无水乙醇回流溶解，趁热过滤，放置结晶，重结晶，滤出结晶，真空干燥即得高纯度牛膝皂苷。[0012]步骤