一种检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103160563A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103160563103160563A(43)申请公布日2013.06.19(21)申请号201110416881.1(22)申请日2011.12.14(71)申请人内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司地址011517内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔盛乐经济园区(72)发明人刘晓川喻东威杜丽薛志清刘志楠李梅刘卫星(74)专利代理机构北京汉德知识产权代理事务所(普通合伙)11328代理人庄一方(51)Int.Cl.C12Q1/06(2006.01)权利要求书2页权利要求书2页说明书7页说明书7页(54)发明名称一种检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法(57)摘要本发明提供了一种检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其接种后培养的条件为：先于16-18℃下培养18-20小时，再于6-7℃下培养4天。本发明检测方法的检测用时较少；其最后形成的菌落较大，计数时不易产生误差；本发明检测方法与6.5℃菌落计数法的检测结果有较好的相关性。CN103160563ACN10365ACN103160563A权利要求书1/2页1.一种检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其特征在于，接种后培养条件为：先于16℃至18℃下培养18小时至20小时，再于6℃至7℃下培养4天。2.一种检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，包括如下步骤：对待测乳或乳制品进行梯度稀释，制成多个梯度样本；将每个所述梯度样本分别接种制成多份菌落培养物；在如权利要求1所述的培养条件下对所述菌落培养物进行培养；所述培养结束后，对培养后的所述菌落培养物进行菌落计数并计算出所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量。3.如权利要求2所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，所述梯度稀释的稀释液选用生理盐水或蛋白胨盐溶液。4.如权利要求2所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，所述接种的方法为：取每个所述梯度样本分别加入无菌平皿中，然后向所述平皿倾注平板牛奶计数琼脂，转动所述平皿使所述梯度样本和所述平板牛奶计数琼脂混合均匀，水平放置所述平皿至混合均匀的物质凝固。5.如权利要求2所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，所述接种的方法为：取每个所述梯度样本分别置于菌落总数测试片内，并使所述梯度样本在所述菌落总数测试片上形成均匀的计数区域，静置所述菌落总数测试片直至所述菌落总数测试片内的物质固化。6.如权利要求4所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，进行所述培养时，所述菌落培养物叠放不超过6个。7.如权利要求5所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，进行所述培养时，所述菌落培养物叠放不超过20个。8.如权利要求2所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，所述接种时，制成每个所述菌落培养物所需的所述梯度样本的用量为1毫升，且每个稀释倍数的所述梯度样本分别同时接种于两份平板牛奶计数琼脂或菌落总数测试片，制成两份所述菌落培养物。9.如权利要求8所述的检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法，其中，所述培养结束后，对培养后的所述菌落培养物进行所述菌落计数，将菌落数为10-300CFU的培养后的所述菌落培养物作为目标培养物，并通过如下方法计算出所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量：若所述目标培养物对应的所述梯度样本涉及1个稀释倍数，则应按所述目标培养物的平均菌落数乘以相应的稀释倍数得到所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量；若所述目标培养物对应的所述梯度样本涉及2个稀释倍数，则采用如下公式计算出所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量：N=∑C／[（n1＋0.1×n2）×d]，式中，N为所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量，单位为CFU/mL，∑C为所有所述目标培养物中菌落数的总和，单位为CFU，n1为所述目标培养物中较低稀释倍数的所述梯度样本对应的所述目标培养物的个数，n2为所述目标培养物中较高稀释倍数的所述梯度样本对应的所述目标培养物的个数，d为所述较低稀释倍数的稀释因数；若所有的培养后的所述菌落培养物的菌落数均少于10CFU，则应按稀释倍数最低的所2CN103160563A权利要求书2/2页述梯度样本对应的两个培养后的所述菌落培养物的平均菌落数乘以相应的稀释倍数得到所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量；若所有的培养后的所述菌落培养物的菌落数均多于300CFU，则应按稀释倍数最高的所述梯度样本对应的两个培养后的所述菌落培养物的平均菌落数乘以相应的稀释倍数得到所述待测乳或乳制品中嗜冷菌含量。3CN103160563A说明书1/7页一种检测乳与乳制品中嗜冷菌含量的方法技术领域[0001]本发明涉及一种检测乳与乳制品中微生物的方法，尤其适用于检测乳与乳制品中嗜冷菌的含量。背景技术[0002]目前，乳与乳制品中嗜冷菌检测方法