一种对肝癌细胞具有pH响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN104587488A(43)申请公布日2015.05.06(21)申请号201510054573.7A61K31/704(2006.01)(2006.01)(22)申请日2015.02.02A61K49/00A61P35/00(2006.01)(71)申请人哈尔滨工业大学地址150001黑龙江省哈尔滨市南岗区西大直街92号(72)发明人黄玉东李大龙贺金梅李纪伟黄鑫程玮璐吴亚东(74)专利代理机构哈尔滨市松花江专利商标事务所23109代理人侯静(51)Int.Cl.A61K47/48(2006.01)A61K9/19(2006.01)A61K47/42(2006.01)A61K47/04(2006.01)权利要求书3页说明书12页附图5页(54)发明名称一种对肝癌细胞具有pH响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法(57)摘要一种对肝癌细胞具有pH响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法，本发明属于生物医用材料领域。本发明是要解决现有方法制备的载体不能特异性的识别靶细胞，药物分子大部分分布于正常组织并被正常细胞摄取，而病变组织中的药物分布较少，造成药物递送能力较低，增加了药物在体内的毒副作用的技术问题。方法：一、模板剂的准备；二、介孔羟基磷灰石纳米粒子的制备；三、介孔羟基磷灰石的氨基化；四、介孔磷灰石的硼酸化；五、乳糖酸功能化牛血清白蛋白的制备；六、具有pH响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备。本发明得到的产物能靶向识别肝癌细胞，减少了正常组织对药物的摄取，降低了药物在体内的毒副作用。CN104587488ACN104587488A权利要求书1/3页1.一种对肝癌细胞具有pH响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法，其特征在于对肝癌细胞具有pH响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法是按以下步骤进行的：一、模板剂的准备：将模板剂F127和泛酸钙单水合物溶解在去离子水中，在搅拌速度为250r/min～400r/min下搅拌至得到清晰乳状液，得到F127-泛酸钙混合液，即得到模板剂；步骤一中所述的模板剂F127与泛酸钙单水合物的质量比为1∶(2.5～8)；步骤一中所述的F127与去离子水的质量比为1∶(15～67)；二、介孔羟基磷灰石纳米粒子的制备：将K2HPO4·3H2O溶解在去离子水中，得到K2HPO4溶液，然后用NH3·H2O调解K2HPO4溶液的pH值至pH值为10～14，再将pH值为10～14的K2HPO4溶液以滴加速度为1.0g/min～3.0g/min滴加到步骤一得到的F127-泛酸钙混合液中，搅拌均匀后采用水浴回流的方式进行加热，控制水浴加热温度为60～100℃，回流时间为24h～48h，完成水浴回流反应，将水浴回流反应后的溶液过滤，收集白色沉淀物，将白色沉淀物在温度为80℃～150℃的真空条件下干燥12h～24h，得到干燥后的白色沉淀物，然后将干燥后的白色沉淀物在温度为200℃～300℃下预烧2h～6h，再在马弗炉中煅烧，控制煅烧温度为500℃～600℃，煅烧时间为8h～10h，得到介孔羟基磷灰石纳米粒子；步骤二中所述的K2HPO4·3H2O的质量与去离子水的体积比为1g∶(10～25)mL；步骤二中所述的pH值为10～14的K2HPO4溶液中的K2HPO4·3H2O质量与步骤一得到的F127-泛酸钙混合液中F127的质量比为1∶(0.5～1.5)；三、介孔羟基磷灰石的氨基化：将步骤二得到的介孔羟基磷灰石纳米粒子均匀分散在甲苯溶液中，在搅拌速度为300r/min～600r/min下搅拌10min～30min后，加入3-氨丙基三甲氧基硅烷，然后置于温度为60℃～80℃的水浴锅中回流24h～48h，离心冷冻干燥后得到氨基化的介孔磷灰石；步骤三中所述的步骤二得到的介孔羟基磷灰石纳米粒子的质量与甲苯溶液的体积的比为1g∶(40～100)mL；步骤三中所述的步骤二得到的介孔羟基磷灰石纳米粒子的质量与3-氨丙基三甲氧基硅烷的体积比为1g∶(2.4～67)mL；四、介孔磷灰石的硼酸化∶将步骤三得到的氨基化的介孔磷灰石均匀分散在二甲基亚砜溶液中，然后在室温下以搅拌速度为400r/min～600r/min搅拌2h～4h，得到氨基化的介孔磷灰石分散液，再将4-羧基苯硼酸、1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物和N-羟基琥珀酰亚胺加入氨基化的介孔磷灰石分散液中，然后在室温下以搅拌速度为300r/min～500r/min搅拌36h～72h，然后依次用蒸馏水和无水乙醇洗涤并离心10～20次，再真空干燥，得到硼酸化的介孔磷灰石；步骤四中所述的步骤三得到的氨基化的介孔磷灰石的质量与二甲基亚砜溶液的体积的