脐带间充质干细胞转化为胰岛细胞的方法.pdf
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脐带间充质干细胞转化为胰岛细胞的方法.pdf
本发明涉及一种脐带间充质干细胞转化为胰岛细胞的方法,包括无菌条件下分离提取脐带间充质干细胞传代培养后,进行诱导:1)在含有胎牛血清的DMEM/F12培养基中加入含β-神经生长因子,激活素A,尼克酰胺,表皮生长因子,进行诱导培养;2)添加含尼克酰胺,碱性成纤维细胞生长因子,胰岛素-转铁蛋白-硒的DMEM/F12培养基继续培养至细胞转化结束,获得胰岛细胞液。通过本发明所获得胰岛细胞不仅数量较多,且胰岛细胞质量较好,能够分泌较多的胰岛素,对于临床移植脐带间充质干细胞治疗1型糖尿病具有重要意义。
促进脐带间充质干细胞定向分化为脂肪细胞的方法.pdf
本发明涉及一种促进脐带间充质干细胞定向分化为脂肪细胞的方法,包括以下步骤:1)将脐带间充质干细胞经培养后,取第三代稳定生长密度为80%‑95%的脐带间充质干细胞,保证了有足够多的基础干细胞,也更便于观察脐带间充质干细胞的分化增殖情况,PBS洗脐带间充质干细胞三遍,除去死细胞,更换新鲜含10%胎牛血清的高糖DMEM,培养15‑24h;2)加入脂肪诱导培养基,培养2‑4天;3)更换新鲜脂肪诱导培养基,培养6‑14天。其具有可定向分化、增殖为脂肪细胞,温和无毒,且分化增殖率高的特点。
促进间充质干细胞定向分化为胰岛细胞的增殖培养方法.pdf
本发明提供了一种促进间充质干细胞定向分化为胰岛细胞的增殖培养方法,其方法包括步骤:(1)获取间充质干细胞,并传代培养;(2)将间充质干细胞接种在培养板上,于培养基A中培养1~2天;之后于培养基B中培养,每天更换一次培养基,共培养7~8天;然后,于培养基C中培养12~15天,获得胰岛细胞。本发明可以获得成熟的胰岛样细胞,并可以使得分化的细胞内外均具有含量高的胰岛素和C‑肽。
脐带间充质干细胞的培养方法.pdf
本发明提供了一种脐带间充质干细胞的培养方法。本发明脐带间充质干细胞培养方法包括如下培养步骤有:将获取的脐带组织块置于干细胞培养基中进行培养处理,其中,所述干细胞培养基中含有干细胞因子和白介素6因子,且所述干细胞因子与白介素6因子的含量比为(5‑20μmol/L):(5‑20ug/ml)。本发明培养方法能够提高脐带间充质干细胞的扩增能力,并获得较高的迁移能力。
脐带间充质干细胞分离培养方法.pdf
本发明公开了脐带间充质干细胞分离培养方法。本发明所要保护的一个技术方案是培养间充质干细胞的组合物。所述组合物由胎牛血清、表皮生长因子和DMEM/F12培养基组成。所述DMEM/F12培养基由L‑谷氨酰胺、MEMNEAA和DMEM/F12基础培养基组成。实验证明使用本发明培养间充质干细胞的组合物分离培养人脐带间充质干细胞并在500g离心力条件下离心收集得到的人脐带间充质干细胞的细胞活率和扩增倍数均增强,细胞回收率也显著提高,并具有较强的成骨成软骨分化的能力,可应用于制备开发治疗骨关节炎相关的药物。