一种检测乳中玉米赤霉烯酮的试纸条.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105334319A(43)申请公布日2016.02.17(21)申请号201510689075.X(22)申请日2015.10.21(71)申请人黑龙江省乳品工业技术开发中心地址150028黑龙江省哈尔滨市松北区科技创新城创新一路2727号(72)发明人满朝新姜毓君丁木赵玥明周文琦(74)专利代理机构哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211代理人耿晓岳(51)Int.Cl.G01N33/558(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图1页(54)发明名称一种检测乳中玉米赤霉烯酮的试纸条(57)摘要本发明公开了一种检测乳中玉米赤霉烯酮的试纸条，属于食品安全检测技术领域。本发明试纸条包括样品垫，胶体金结合垫，反应膜，吸水垫和底板，反应膜位于底板中间，反应膜的一侧从上至下依次设有交叠连接的样品垫和胶体金结合垫，另一侧设有吸水垫；胶体金结合垫和吸水垫均与反应膜交叠连接；反应膜上设有检测线和控制线；检测线上包被有玉米赤霉烯酮半抗原-牛血清白蛋白偶联物；控制线上包被有羊抗鼠IgG。本发明试纸条操作简单、检测成本低、检测时间短、特异性好、试纸条稳定性好、灵敏度高，检测范围为30ng/ml～200ng/ml，检测限可低达30ng/ml，测时间可控制在10分钟以内。CN105334319ACN105334319A权利要求书1/2页1.一种检测乳中玉米赤霉烯酮的试纸条，包括样品垫(1)，胶体金结合垫(2)，反应膜(3)，吸水垫(4)和底板(5)，其特征在于，反应膜(3)位于底板(5)中间，反应膜(3)的一侧从上至下依次设有交叠连接的样品垫(1)和胶体金结合垫(2)，另一侧设有吸水垫(4)；所述胶体金结合垫(2)和吸水垫(4)均与反应膜(3)交叠连接；所述反应膜(3)上设有检测线(31)和控制线(32)；所述检测线(31)上包被有玉米赤霉烯酮半抗原-牛血清白蛋白偶联物；所述控制线(32)上包被有羊抗鼠IgG；所述玉米赤霉烯酮半抗原-牛血清白蛋白偶联物在检测线(31)上的包被量为每厘米检测线上包被2.0ug；所述羊抗鼠IgG在控制线(32)上的包被量为每厘米质控线(32)上包被0.8ug。2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述样品垫(1)长18mm-20mm，宽4mm-5mm；所述胶体金结合垫(2)长5mm-7mm，宽4mm-5mm；所述吸水垫(4)长18mm-20mm，宽4mm-5mm。3.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述检测线(31)和控制线(32)间距4mm-7mm。4.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述吸水垫(4)与反应膜(3)交叠3.1mm-3.7mm；所述胶体金结合垫(2)和反应膜(3)交叠3.1mm-3.5mm；所述样品垫(1)和胶体金结合垫(2)交叠3.1mm-3.5mm。5.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述玉米赤霉烯酮半抗原-牛血清白蛋白偶联物，喷涂浓度为2mg/mL、喷量为1.0μL/cm；所述羊抗鼠IgG，喷涂浓度为1mg/mL、喷量为0.8μL/cm。6.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述胶体金结合垫(2)的制备方法如下：1)抗体-胶体金标记物溶液的制备：每1mL胶体金溶液，加入1μL0.1mol/LK2CO3和3μL0.9mg/mL抗玉米赤霉烯酮单抗，混匀后避光静置15min；然后加入100μL10％BSA溶液，混匀后避光静置15min；于4℃、10000r/min下离心15min，将弃去上清液后所得的沉淀用100μL20mM复溶液溶解，获得抗体-胶体金标记物溶液，4℃保存备用；所述复溶液为包含1％BSA、0.5％Tween20和5％海藻糖，且pH值为8.0的硼酸缓冲溶液；2)将待处理的金标垫浸泡于含0.5％Tween20且pH为8.0的PBS溶液中，均匀浸湿后45℃烘干2h备用，获得预处理金标垫；3)将步骤1)所制备的抗体-胶体金标记物溶液用步骤1)所述复溶液按照体积比为1:4进行稀释，获得抗体-胶体金标记物溶液的稀释液；4)取步骤2)所得预处理金标垫浸泡于步骤3)所制备的抗体-胶体金标记物溶液的稀释液中，每6cm预处理金标垫浸于100μL抗体-胶体金标记物溶液的稀释液中，置于37℃烘干1h，获得胶体金结合垫(2)，置于干燥环境备用。7.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述反应膜(3)，为硝酸纤维素膜。8.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述样品垫(1)，处理方法是将其浸于50mM硼酸缓冲液中，均匀浸湿后于45℃烘干备用；所述硼酸缓冲液包含1％BSA，0.5％Tween20，2％PVP和5％海藻糖，pH值为8.0。9.一种利用权利要求1-8所述任一试纸条检测乳中玉米